题目内容
【题目】在遗传病监测及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析,PCR技术能快速扩增DNA片段,在几个小时内复制上百万份的DNA拷贝,有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题:
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(1) 在PCR中先用95 ℃高温处理的目的是________;而这一过程中在细胞内DNA复制时是通过________实现的。
(2) 在PCR技术中所需要的引物实质上是一种________,在相应的横线上写出引物Ⅱ________。
(3) 在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA:________(写出①、②中的一种即可)。
(4) 若将1个DNA分子拷贝10次,则需要在缓冲液中至少加入________个引物。
(5) 在对样品DNA进行分析的过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,要去除这些组蛋白可加入的物质是________。
【答案】 使DNA变性(使DNA的两条链解开) 解旋酶的催化 (一小段)单链DNA或RNA分子 5′—G—A—OH(或HO—A—G—5′)
或
211-2(或答2046) 蛋白酶
【解析】本题考查基因工程中的PCR技术,解题要点是对PCR技术的原理、步骤的识记。
(1)在PCR技术中,用95 ℃高温处理的目的是使DNA分子中的氢键断裂,两条链解开,即使DNA分子变性。这一过程在细胞内DNA复制时是通过解旋酶的催化实现的。
(2)引物实质上是一段单链DNA或RNA分子,它能与解开的DNA母链的3′端结合,为DNA聚合酶提供吸附位点。引物Ⅱ的序列是:5′—G—A—OH。
(3)根据(2)的分析,循环一次后生成的DNA是:
或![]()
(4)在DNA分子扩增时,需要2种引物,由于新合成的子链都需要引物作为复制的起点,故所需的引物数目等于新合成的DNA子链数目,即2×210-2个。
(5)蛋白酶能催化蛋白质分解,故除去DNA中掺杂的组蛋白可加入蛋白酶。
[点睛]:PCR技术易错的知识点:关于引物的设计:引物长度约17个碱基;两个引物之间不应发生互补;引物与DNA模板链结合如图所示:![]()