Question

6．埃博拉病毒（EBO）是一种能引起人类产生埃博拉出血热的强致死性RNA病毒．EBO外壳蛋白具有较强的免疫原性，可用来制备疫苗，也可用于制备单克隆抗体．请回答下列问题：
（1）利用基因工程方法制备EBO外壳蛋白，以EBO外壳蛋白为抗原制备疫苗是预防埃博拉出血热的一种有效措施．为了从牛分泌的乳汁中提取EBO外壳蛋白，在将EBO蛋白基因导入牛受体细胞前，基因的前端必须含有使其能在牛的乳腺细胞中特异性表达的（乳腺蛋白基因的）启动子，它是RNA聚合酶识别和结合的位点．这种通过分泌乳汁来生产所需要的药品的转基因动物称为乳腺生物反应器．
（2）利用EBO作为抗原处理小鼠，然后提取小鼠的B淋巴细胞（浆细胞或效应B细胞）与骨髓瘤细胞进行融合，再用特定的选择培养基进行筛选，获得杂交瘤细胞，杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得具有特性的杂交瘤细胞，最后将杂交瘤细胞在体外或体内大规模培养，从细胞培养液或小鼠腹水中就可以提取出大量单克隆抗体，单克隆抗体最主要的优点是特异性强，灵敏度高，并可能大量制备．

Answer 1

分析 1、动物乳腺生物反应器是基于转基因技术平台，使外源基因导入动物基因组中并定位表达于动物乳腺，利用动物乳腺天然、高效合成并分泌蛋白的能力，在动物的乳汁中生产一些具有重要价值产品的转基因动物的总称．
乳腺生物反应器是最理想的生物反应器，它的优点：（1）药物蛋白只在乳腺内，对动物的生理活动不影响．（2）长期收集也不会对动物造成伤害．（3）产品成本低．（4）无论纯化还是使用都很方便．
2、单克隆抗体的制备过程中利用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术，在制备的过程中的两次筛选考生必须识记，同时在进行杂交瘤细胞体外培养的过程需注意培养条件．

解答 解：（1）通过分泌乳汁来生产所需要的药品的转基因动物称为乳腺生物反应器，乳腺生物反应器是最理想的生物反应器．为了从牛分泌的乳汁中提取EBO外壳蛋白，在将EBO蛋白基因导入牛受体细胞前，基因的前端必须含有使其能在牛的乳腺细胞中特异性表达的（乳腺蛋白基因的）启动子，启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点．
（2）在单克隆抗体的制备过程中，利用EBO作为抗原处理小鼠，然后提取小鼠的B淋巴细胞（浆细胞或效应B细胞）与骨髓瘤细胞进行融合，再用特定的选择培养基进行筛选，获得杂交瘤细胞，杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得既能无限增殖，又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，最后将杂交瘤细胞在体外或体内大规模培养，从细胞培养液或小鼠腹水中就可以提取出大量单克隆抗体，单克隆抗体最主要的优点是特异性强，灵敏度高，并可能大量制备．
故答案为：
（1）（乳腺蛋白基因的）启动子   RNA聚合酶     乳腺生物反应器
（2）B淋巴细胞（浆细胞或效应B细胞）    选择培养基     克隆化培养    抗体检测
既能无限增殖，又能分泌特异性抗体      特异性强，灵敏度高，并可能大量制备

点评 本题考查了基因工程和细胞工程的有关知识，要求考生掌握乳腺生物反应器的优点和操作过程，识记单克隆抗体制备的过程、优点及应用等方面的知识．