农业生产上广泛使用一种含氮有机化合物的除草剂在土坡中不易降解.长期使用可导致土壤污染．为修复被该除草剂污染的土壤.可按下面程序筛选出能降解该除草剂的细菌．(已知含一定量该除草剂的培养基不透明)(1)从长期使用该除草剂的土坡中取上样时.一般要先铲去．(2)配制的培养基含有类营养物质．培养基在各种成分都溶化后灭� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

农业生产上广泛使用一种含氮有机化合物的除草剂在土坡中不易降解，长期使用可导致土壤污染．为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序筛选出能降解该除草剂的细菌．（已知含一定量该除草剂的培养基不透明）

（1）从长期使用该除草剂的土坡中取上样时，一般要先铲去

．
（2）配制的培养基含有

类营养物质．培养基在各种成分都溶化后灭菌之前，要进行的操作是

（3）图示过程采用了

法将菌种接种在平板上，然后将培养皿

放在恒温菌中培养一段时间，观察培养基上形成的菌落．
（4）科研人员另取土样5g，在酒精灯火焰旁加入45mL的

中配制成稀释10倍土壤溶液，然后再配制一定浓度梯度的土壤溶液．将10²倍的稀释液吸取0.1mL加入到固体培养基上，用

将菌液铺平，将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h-48h，每隔一定时观察并统计具有

（现象）
的菌落数．结果如下表，则每克土壤样品中目的菌株数是

．

时间	0	4	8	12	16	24	28	32	36	40	44	48
菌落数	0	0	8	20	24	37	40	40	40	31	15	5

考点：微生物的利用,微生物的分离和培养

专题：

分析：从土壤中分离目的微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株．筛选目的微生物需要使用选择培养基．培养基的主要营养物质是碳源、氮源、水和无机盐等，培养基在各种成分都溶化先调节pH后灭菌．固体培养基上的接种方法主要是稀释涂布平板法和平板划线法．

解答： 解：（1）筛选能降解该除草剂的细菌，进行土壤取样时，一般要先铲去表层土．
（2）培养基的主要营养物质是碳源、氮源、水和无机盐等4种，培养基在各种成分都溶化先调节pH后灭菌．
（3）据图分析：图示过程采用的是平板划线法接种，接种后需要将培养皿倒置培养，以防水汽凝集滴入培养基而污染．
（4）梯度稀释时，为避免污染，应该使用无菌水稀释，进行目的微生物的鉴别时可以使用稀释涂布平板法接种培养，接种使用的工具是涂布器，由于该除草剂的培养基不透明，能降解该除草剂的细菌形成的菌落可以出现透明带，所以可以鉴别降解该除草剂的细菌．据表分析：应当选择28、30、32小时时的菌落进行统计计数，所以每克土壤样品中目的菌株数是4.0×10⁵．
故答案为：
（1）表层土
（2）4     调节pH
（3）平板划线    倒置
（4）无菌水     涂布器     透明带     4.0×10⁵

点评：本题主要考查微生物培养的相关知识，意在强化微生物培养的所以操作过程，提高学生实验技能．