Question

20．牛奶中富含蛋白质，长期饮用有助于増强体质，但牛奶同时也是多种疾病的传播载体．国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30000个．以下是牛奶消毒及细菌检测实验．

（1）图中步骤①称为巴氏消毒法．步骤②是系列稀释（或梯度稀释），培养细菌的方法除此以外，还有平板
划线法．
（2）培养基中的蛋白胨可以为微生物提供碳源、氮源（和维生素）．培养基③的类型属于天然培养基．进行步骤③操作时，应选用下列中的哪种工具？B．为了避免杂菌污染，此步骤应在酒精灯火焰附近进行．
（3）将接种后的培养基和作为对照的一个未接种的培养基同时放入37℃恒温培养箱中，培养36小时．取出后统计各平板的菌落数，结果如下表所示．应该选择其中稀释倍数为10^-2的平板进行计数，经过消毒后的牛奶中，细菌数大约是8500个/mL．

牛奶稀释倍数	10-2	10-3	10-4
平板1菌落数	87	10	1
平板2菌落数	83	12	1
平板3菌落数	85	10	0

Answer 1

分析 分析图解：图中①表示用巴士消毒法对牛奶进行消毒，步骤②表示对牛奶进行系列稀释，步骤③表示利用稀释涂布平板法对牛奶中细菌进行培养计数．

解答 解：（1）图中步骤①利用80℃、15min对牛奶进行巴氏消毒．步骤②是系列稀释（或梯度稀释）．图示为稀释涂布平板法，培养细菌的方法除此以外，还有平板划线法．
（2）培养基中的蛋白胨可以为微生物提供碳源、氮源（和维生素）．培养基③的类型属于天然培养基．进行步骤③操作时，应选用涂布器，即图B工具．为了避免杂菌污染，此步骤应在酒精灯火焰附近进行．
（3）将接种后的培养基和作为对照的一个未接种的培养基同时放入37℃恒温培养箱中，培养36小时．用稀释涂布平板法测定同一样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的进行记数，求其平均值，取出后统计各平板的菌落数，因此根据表格数据，应该选择其中稀释倍数为10^-2的平板进行计数，经过消毒后的牛奶中，细菌数大约是=（87+83+85）÷3×10²=8500个/mL．
故答案为：
（1）巴氏    系列稀释（或梯度稀释）   平板划线法
（2）碳源、氮源（和维生素）  天然培养基    B    酒精灯火焰
（3）一个未接种的培养基    10^-2    8500个

点评 本题考查了微生物培养过程中的无菌技术、分离微生物的方法，主要考查学生设计和完善实验步骤，分析实验结果获取结论的能力和提出问题进行进一步探究的能力，利用所学的微生物知识解决生活问题的能力．