Question

16．毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关．获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图．

（1）过程①中最常用的运载工具是质粒，所需要的酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶．
（2）在过程②中，用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞．在培养过程中，将成纤维细胞置于5% CO₂的气体环境中，CO₂的作用是维持培养基（液）的pH．
（3）在过程③中，用促性腺激素处理以获取更多的卵（母）细胞．
（4）在过程④中，对成熟卵（母）细胞进行去核处理．
（5）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是（早期）胚胎培养．在胚胎移植前，通过胚胎分割技术可获得较多胚胎．

Answer 1

分析 分析图解：图中①表示基因表达载体的构建，一般将目的基因与运载体利用限制酶和DNA连接酶构成重组质粒；过程②表示利用动物细胞培养技术培养受体细胞；过程③为通过超数排卵的方法获得更多的卵细胞，过程④表示细胞核移植过程．

解答 解：（1）基因工程中，运载工具包括质粒、噬菌体及动植物病毒等，其中质粒是主要运载工具；①表示基因表达载体的构建过程，首先需要限制酶切割含有目的基因的DNA和运载体DNA，再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组质粒．
（2）胰蛋白酶可将组织块分散成单个细胞；动物细胞培养过程中需要一定的气体环境（95%氧气和5%二氧化碳），其中5%CO₂的作用是维持培养基（液）的pH．
（3）要得到更多的卵（母）细胞需用促性腺激素对动物进行超数排卵处理．
（4）成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行去核处理，以保证克隆后代的遗传性状主要来自于供体核．
（5）从重组细胞到早期胚胎需要才用早期胚胎培养技术；在胚胎移植时，可通过胚胎分割技术获得更多的胚胎．
故答案为：
（1）质粒      限制性核酸内切酶和DNA 连接酶
（2）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶 ）     维持培养基（液）的pH
（3）促性腺激素
（4）去核
（5）（早期）胚胎培养       胚胎分割

点评 本题结合转基因山羊培育过程图，考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记所列知识要点，能准确判断图中各过程的名称，并能在较简单的情境中使用，属于考纲识记层次的考查．