题目内容
【题目】科学家从某无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因（prG)，该基因能激发细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了新思路。某国家重点实验室准备探索利用基因工程生产单克隆抗体，请回答下列问题：
（1）实验室已获得无限增殖调控基因（prG)。在体外，可采用__________技术大量扩增该目的基因。该技术的基本反应过程：目的基因DNA受热___________后解链为单链，____________与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶的作用下进行____________，如此重复循环多次。该技术的前提是要有___________，以便根据这一序列合成引物。
（2）该基因工程操作的核心是_________。本研究中，受体细胞为__________，欲将目的基因转入受体细胞，常采用___________方法。若实验成功，则受体细胞既能____________，又能____________。
（3）制备单克隆抗体通常选用细胞融合技术，使_______细胞与___________细胞融合，融合成功的细胞经过筛选就是所需要的_____________细胞。
【答案】 PCR 变性 引物 延伸 一段已知目的基因的核苷酸序列 基因表达载体的构建 （经抗原刺激）B细胞 显微注射 无限增殖 产生抗体 （经抗原刺激）B 骨髓瘤 杂交瘤
【解析】试题分析：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。PCR的原理是DNA复制，需要的条件包括：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶)。PCR扩增DNA的过程包括：高温变性、低温复性、中温延伸过程。因此，利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热形成单链并与引物结合，在Taq聚合酶的作用下延伸形成DNA。基因工程操作的四个基本步骤是：获取目的基因,基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定.当动物细胞作受体细胞时,一般采用显微注射法将目的基因导入。
(1) 结合前面的分析，为了得到大量的目的基因，可通过PCR技术实现。该技术首先是将目的基因DNA受热变性后解链为单链，加入的一对引物分别与解开的两条单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶的作用下进行延伸，如此重复循环多次。该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。
(2)基因工程操作的四个基本步骤是：获取目的基因、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定。其中核心步骤是基因表达载体的构建。抗体是由已获得免疫的(经抗原刺激)B细胞分泌的，将目的基因导入动物细胞常采用的方法是显微注射法，若实验成功，则受体细胞既能无限增殖，又能产生抗体。
(3)制备单克隆抗体通常选用细胞融合技术，使(经抗原刺激)B细胞与骨髓瘤细胞融合，融合成功的细胞经过筛选就是所需要的杂交瘤细胞。
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