Question

14．如图为兰州环保部门对流经我市黄河中段水域大肠杆菌进行检测的操作和配方图．据图回答下列相关问题：

（1）图甲中滤膜的孔径应小于（填“大于”或“小于”）大肠杆菌，该计数方法的名称是滤膜法．
（2）配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐和琼脂以外，还应加入氮源（蛋白胨）．待各成分都熔化后，调整pH和灭菌，待冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板．大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长呈黑色菌落，从功能上划分，该培养基属于鉴别培养基．
（3）用平板划线法分离样液中的大肠杆菌，操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是将聚集的菌体逐步稀释，以便获得单个菌落．
（4）要检测样液中的大肠杆菌含量，取1ml河水样本，加入9ml无菌水，充分混匀后，在5个平板上用涂布平板法分别接入0.1ml样液，在37℃的培养箱中放置48小时，5个平板上的黑色菌落数分别为5、51、50、49、102．据此可得出1ml河水样本中活菌数为5×10³（或5000）个．

Answer 1

分析 分析题图可知，实验将待测水样进行过滤，得到的滤膜进行微生物培养，因此水中的大肠杆菌应留在滤膜上，则滤膜上小孔的直径大小需要控制．
培养基的基本成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源，另外鉴别培养基是固体培养基，必须加入凝固剂琼脂．

解答 解：（1）分析图解可知，实验将待测水样进行过滤，得到的滤膜进行微生物培养，因此水中的大肠杆菌应留在滤膜上，即图甲中滤膜的孔径应小于大肠杆菌，该计数方法为滤膜法．
（2）培养基的基本成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源，图中乳糖为碳源，因此培养基中还应该加入氮源．待各成分都熔化后，调整pH和灭菌，待冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板．大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长呈黑色菌落，从功能上划分，该培养基属于鉴别（鉴定）培养基．
（3）用平板划线法分离样液中的大肠杆菌，操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是将聚集的菌体逐步稀释，以便获得单个菌落．
（4）取1ml河水样本，加入9ml无菌水，说明稀释倍数为10倍；根据根据题干数据，菌落数为5和102的数据与其它数据相差太大，应去除，因此可以计算1ml河水样本中活菌数=（51+50+49）÷3÷0.1×10=5000个．
故答案为：
（1）小于    滤膜法
（2）氮源（蛋白胨）倒平板   鉴别
（3）将聚集的菌体逐步稀释，以便获得单个菌落
（4）5×10³（或5000）

点评 本题结合图解，考查了微生物的分离和培养等知识，要求考生识记微生物无菌技术的相关内容；识记培养基的成分及接种微生物的方法，能根据图中信息准确答题．