题目内容

13．回答下列关于现代生物科技的问题：
（1）动物细胞培养时为了将组织分散成单个细胞，常用胰蛋白酶（胶原蛋白酶）处理剪碎的组织块，并用培养液将细胞稀释制成细胞悬液．
（2）动物细胞培养时需要通入5%的CO2，其目的是维持培养基的pH，为了防止杂菌污染，通常要在培养基中添加抗生素．
（3）动物细胞核移植时普遍使用的去核方法是显微操作去核法；常选用处于MⅡ中期（减数第二次分裂中期）（时期）的卵母细胞作为受体细胞，主要是因为卵细胞大，易操作，含有促进细胞全能性表达的相关物质．

分析 1、动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎经过胚胎移植最终发育为动物个体．核移植得到的动物称克隆动物．该过程中采用显微操作去核法去除卵母细胞中细胞核．
2、取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．
3、培养条件：
（1）无菌无毒环境：无菌--对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素．；无毒--定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害．
（2）营养：
成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分．
培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基）
（3）温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4．
（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养．O2：是细胞代谢所必需的  CO2主要作用是维持培养液的pH．

解答 解：（1）动物组织培养需用胰蛋白酶将组织分散成单个细胞，并用培养液将细胞稀释制成细胞悬浮液．
（2）动物细胞培养时需要通入5%的CO2，其目的是维持培养基的pH，在培养基中添加抗生素，防止杂菌污染．
（3）体细胞核移植的过程中，去除卵母细胞中的细胞核可采用显微操作去核法．因为卵细胞大，易操作，含有促进细胞全能性表达的相关物质，因此常选用处于MⅡ中期的卵母细胞作为受体细胞．
故答案为：
（1）胰蛋白酶（胶原蛋白酶）   细胞悬液
（2）维持培养基的pH    抗生素
（3）显微操作去核法   MⅡ中期（减数第二次分裂中期）      细胞全能性

点评 本题考查动物细胞培养、动物细胞核移植技术的相关知识，要求考生识记动物细胞核移植的概念、过程及采用的技术手段，明确克隆动物的细胞核均来自供体的细胞核，而细胞质基因来自受体细胞，另外关键是掌握动物细胞培养的过程和条件，再对选项作出准确的判断．

练习册系列答案
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