Question

10．动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础，在动物细胞工程的其他技术中都得广泛应用．下面是与动物细胞工程相关的问题，请分析回答：
（1）在进行动物细胞培养时，首先要将动物组织剪碎，然后用胰蛋白酶处理，以分散成单个细胞，制成细胞悬液．
（2）动物细胞培养时，要保证细胞必需的营养、适宜的温度和pH条件，还要提供无菌、无毒和适宜的气体环境．为达到无菌、无毒的环境条件，除了要对培养液和培养器具进行消毒外，还要①在培养液中添加一定量的抗生素，②定期更换培养液．气体环境中CO₂的作用是维持培养液的pH．
（3）应用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，原因是10代以后的细胞遗传物质可能发生突变（或保证供体细胞正常的遗传基础）．

Answer 1

分析 1、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养．
2、动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理．通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染．此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害．②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等．通常需加入血清、血浆等天然成分．③温度：适宜温度：哺乳动物多是36.5℃+0.5℃；pH：7.2～7.4．④气体环境：95%空气+5%CO₂．O₂是细胞代谢所必需的，CO₂的主要作用是维持培养液的pH．

解答 解：（1）在进行动物细胞培养时，首先要将动物组织剪碎，然后用胰蛋白酶处理，以使其分散成单个细胞，制成细胞悬液．
（2）为达到无菌、无毒的环境条件，除了要对培养液和培养器具进行消毒外，还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染．此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害．气体环境中CO₂的作用是维持培养液的pH．
（3）10代以后的细胞遗传物质可能发生突变（或保证供体细胞正常的遗传基础），因此一般选用传代10代以内的细胞应用于核移植的供体细胞．
故答案为：
（1）胰蛋白酶
（2）在培养液中添加一定量的抗生素           定期更换培养液             维持培养液的pH
（3）10代以后的细胞遗传物质可能发生突变（或保证供体细胞正常的遗传基础）

点评 本题考查了动物细胞培养的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查．