Question

8．请回答下列问题．
（1）进行菊花的组织培养，除要提供适宜的营养物质和激素外，还要控制适宜的pH、温度、光照等条件．
（2）为了调查南充市西河的水质状况，某兴趣小组决定测定该河流水样中的细菌含量，并对细菌进行分离．
①该小组采用涂布法检测水样中的细菌含量．将1mL水样稀释100倍，在3个培养基上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个培养基上的菌落数分别为39、38、和37．此可得出每升水样中的活菌数约为3.8×10⁷个，这样统计的活菌数往往比实际数目低，因为因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落．同时取若干灭菌后的空白培养基一起培养，这样做的目的是作为对照，检测培养基灭菌是否合格（排除培养基灭菌不彻底或培养过程中杂菌污染）．
②该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养．结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快．其原因是：振荡培养能提高培养液中溶解氧（氧气）的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率．

Answer 1

分析 1、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
2、计算样品菌液中的菌株数时，每克样品中的菌株数=（C÷V）×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表样品菌液的稀释倍数．

解答 解：（1）植物组织培养技术的培养条件：①在无菌条件下进行人工操作．②保证水、无机盐、碳源（常用蔗糖）、氮源（含氮有机物）、生长因子（维生素）等营养物质的供应．③需要添加一些植物生长调节物质，主要是生长素和细胞分裂素．④愈伤组织再分化到一定阶段，形成叶绿体，能进行光合作用，故需光照．
（2）①由题意知，平板上生长的平均菌落数=（39+38+37）÷3=38个，则1ml水样中的菌落数=（C÷V）×M=（38÷0.1）×100=3.8×10⁴个，每升水样中的活菌数为3.8×10⁴×10³=3.8×10⁷个．由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此这样统计的活菌数目往往比实际数目低；微生物培养过程应该进行无菌操作，配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌，该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是：作为对照，检测培养基平板灭菌是否合格． 
②振荡培养比静置培养的细菌生长速度快，由此可以说明该细菌是需要菌，由于振荡培养提高了培养液中溶解氧的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，这样提高了营养物质的利用率，使细菌生长速度加快．
故答案为：
（1）pH    温度   光照
（2）①3.8×10⁷     低   因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落       作为对照，检测培养基灭菌是否合格（排除培养基灭菌不彻底或培养过程中杂菌污染）
②溶解氧 （氧气）     营养物质

点评 本题的知识点是植物组织的培养、微生物的分离和培养，主要考查学生对相关基础知识的掌握与综合运用能力．