Question

6．中国经济的发展深刻地影响着农村生活，过去农村大多以农作物秸秆作为主要能源用于做饭、取暖等，现在基本上已经被电能、天然气等能源所取代，从而造成一些不必要的能源闲置及浪费．其实农作物秸秆是一种廉价易得的资源，有很大的利用价值．请回答下列相关问题：
（1）秸秆的主要成分是纤维素，植物细胞的细胞壁也是由该成分构成的．
（2）从土壤中分离分解纤维素的微生物的实验流程如下：
（一）土壤取样→（二）选择培养→（三）梯度稀释→（四）将样品涂布到鉴别培养基上→（五）挑选菌落．该过程中步骤（二）选择培养基的营养物质的特点是以纤维素作为唯一碳源；步骤（五）挑选菌落时应该挑选出现透明圈的菌落．
（3）为了测定细菌含量，将稀释度为10⁴的菌液均按0.1mL的用量各接种3个平板，在适宜条件下培养一段时间后，3个平板上长出的菌落数分别为42、55、38，则每升菌液的活菌数约为4.5×10⁹个．活菌的实际数目往往比该方法测得的数据多（填“多”“少”或“相等”）．

Answer 1

分析 1、分解纤维素的微生物的分离实验的原理：
①土壤中存在着大量纤维素分解酶，包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶．纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长．
②在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌．
2、统计菌落数目的方法
（1）显微镜直接计数法
 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌．
（2）间接计数法（活菌计数法）
 ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌．
②操作
a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性．
b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数．
③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数．

解答 解：（1）秸秆的主要成分是纤维素，植物细胞的细胞壁也是由该成分构成的．
（2）要从土壤中分离分解纤维素的微生物，应该用以纤维素作为唯一碳源的选择培养基；挑选菌落时，应该挑选出现透明圈的菌落．
（3）为了测定细菌含量，将稀释度为10⁴的菌液均按0.1mL的用量各接种3个平板，在适宜条件下培养一段时间后，3个平板上长出的菌落数分别为42、55、38，则每升菌液的活菌数约为$\frac{42+55+38}{3}$×10⁴×1000×$\frac{1}{0.1}$=4.5×10⁹ 个．当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落，因此活菌的实际数目往往比该方法测得的数据多．
故答案为：
（1）纤维素    细胞壁
（2）梯度稀释   以纤维素作为唯一碳源     透明圈
（3）4.5×10⁹     多

点评 本题考查微生物分离和培养，要求考生识记培养基的种类及功能；识记接种微生物常用的两种方法及计数微生物常用的方法，能结合所学的知识准确答题．