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绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因,可以合成一种抗TMV蛋白,叶片对TMV具有抗感染性.烟草是重要的经济作物,由于TMV的感染会导致大幅度减产.研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草,主要流程如图所示.

(1)科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA,然后合成目的基因.图中过程①表示 ,获得的DNA必须在两侧添加 和终止子,还要添加 酶能识别切割的碱基序列.

(2)由图分析,在过程③构建的重组Ti质粒上应该含有的标记基因是 基因,重组Ti质粒导入烟草体细胞的方法是 .

(3)在过程⑤培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外,还必须添加 ,以保证受体细胞能培养成再生植株.

(4)过程⑥可采取 的方法,检测植株是否合成了抗TMV蛋白.在个体水平的鉴定过程中,可通过 的方法来确定植株是否具有抗性.

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