题目内容
苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着能降解苯酚的微生物．某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品，请回答下列问题：
（1）②中培养菌株的选择培养基中应加入 作为碳源，②中不同浓度碳源的培养基 （A．影响；B．不影响）细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用 法．
（2）④为对照、微生物在④中不生长、在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于 ；使用 法可以在⑥上获得单菌落．采用固体平板培养细菌时进行倒置培养是为了防止 ．
（3）用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株，一定时间后，测定 来比较不同菌株降解苯酚能力的大小．
（4）实验过程中对 、 、 进行无菌操作．
（1）②中培养菌株的选择培养基中应加入
（2）④为对照、微生物在④中不生长、在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于
（3）用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株，一定时间后，测定
（4）实验过程中对
考点：微生物的分离和培养
专题：
分析：（1）本题考查细菌的分离技术．题目中所筛选的细菌“只能”降解苯酚，故可采用以苯酚为唯一碳源的选择培养基筛选，含除苯酚外其他碳源的培养基作为对照．培养液中苯酚浓度下降的速度可反映该菌对苯酚的降解能力，严格灭菌、无菌操作可有效防止实验过程中的杂菌污染．
（2）测定微生物数量的方法：
①直接计数法：常用显微镜直接技术法，一般适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数．
②间接计数法：常用稀释平板计数法，平板培养基上长出一个菌落就代表原待测样品中一个微生物个体．
（2）测定微生物数量的方法：
①直接计数法：常用显微镜直接技术法，一般适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数．
②间接计数法：常用稀释平板计数法，平板培养基上长出一个菌落就代表原待测样品中一个微生物个体．
解答：
解：（1）选择分解苯酚的菌的培养基是以苯酚为唯一碳源的培养基；苯酚是唯一的碳源，当苯酚消耗尽时，菌株因缺少碳源而不能继续繁殖，所以②中不同浓度的碳源A影响细菌数量；一般采用稀释涂布平板法来测定②中活菌数目．
（2）④与⑤培养基的主要区别在于④的培养基没有加入苯酚作为碳源，⑤培养基的中加入苯酚作为碳源；使用释涂布平板法或平板划线法可以在⑥上获得单菌落．采用固体平板培养细菌时要倒置培养，以防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基．
（3）取多支洁净培养瓶→分别加入相同培养基加等量的苯酚→分别接种多种等量的来自不同菌株的菌种→在相同的适宜条件下培养相同时间→再检测这多支瓶内培养基的苯酚的含量或PH值的大小，从而比较不同菌株降解苯酚能力的大小．
（4）从制备培养基到接种与培养等全部实验过程要无菌操作：无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法．获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵：
a．实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和和消毒；
b．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；
c．为避免周围环境中微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
d．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触．
故答案为：
（1）苯酚 A 平板菌落计数（活菌计数或菌落计数）
（2）④的培养基没有加入苯酚作为碳源 稀释涂布平板法或平板划线法 培养过程产生的水分影响微生物的生长
（3）一定时间后，测定培养液中苯酚含量或PH值的大小
（4）培养基灭菌 接种环境灭菌 接种过程无菌操作
（2）④与⑤培养基的主要区别在于④的培养基没有加入苯酚作为碳源，⑤培养基的中加入苯酚作为碳源；使用释涂布平板法或平板划线法可以在⑥上获得单菌落．采用固体平板培养细菌时要倒置培养，以防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基．
（3）取多支洁净培养瓶→分别加入相同培养基加等量的苯酚→分别接种多种等量的来自不同菌株的菌种→在相同的适宜条件下培养相同时间→再检测这多支瓶内培养基的苯酚的含量或PH值的大小，从而比较不同菌株降解苯酚能力的大小．
（4）从制备培养基到接种与培养等全部实验过程要无菌操作：无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法．获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵：
a．实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和和消毒；
b．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；
c．为避免周围环境中微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
d．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触．
故答案为：
（1）苯酚 A 平板菌落计数（活菌计数或菌落计数）
（2）④的培养基没有加入苯酚作为碳源 稀释涂布平板法或平板划线法 培养过程产生的水分影响微生物的生长
（3）一定时间后，测定培养液中苯酚含量或PH值的大小
（4）培养基灭菌 接种环境灭菌 接种过程无菌操作
点评：本题综合微生物的培养及实验设计和分析能力，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；能运用所学知识与观点，对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力；对实验现象和结果进行解释、分析、处理的能力．
练习册系列答案
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