Question

科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是—G^↓GATCC— ，限制酶II的识别序列和切点是—^↓GATC—，据图回答：

（1）过程①表示的是采取___________________的方法来获取目的基因。

（2）根据图示分析，在构建基因表达载体过程中，应用限制酶_________（填“I”或“II”）切割目的基因。用限制酶切割目的基因和运载体后形成的黏性末端通过_____________原则进行连接。

（3）人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组，原因是____________________。

（4）人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为__________________________。

（5）将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，待平板冷凝后要将平板倒置，其意义是__________________________________________。经过一定时间培养后，能够在含有氨苄青霉素的培养基上生长的，说明已导入了_______________，反之则没有导入。

Answer 1

（1） 反转录法（人工合成法）

（2） Ⅱ  ；   碱基互补配对

（3）人的基因与大肠杆菌DNA的双螺旋结构相同

（4）共用一套（遗传）密码子

（5）防止皿盖冷却水倒流入培养基（合理即可得分）；  普通质粒或重组质粒（缺一不给分）

解析:

（1）由课本知目的基因的两条途径是：①将从细胞中提取分离出的以目的基因为模板转录为成的 ；②据蛋白质中氨基酸序列 mRNA中碱基序列 DNA碱基序列 目的基因。过程①是由mNA来合成DNA（目的基因），是人工合成目的基因的反转录法。

（2）由图中重组质粒的信息知，目的基因插入在四环素的抗性基因中，用到限制酶因该是切割四环素的抗性基因，因此应用限制酶II的识别序列和切点是—^↓GATC—。用同种限制酶切割目的基因和运载体后形成的黏性末端的碱基通过碱基互补配对原则形成氢键 连接。

（3） 人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组，因为DNA结构都一样，都是由四种脱氧核苷酸构成的双螺旋结构。

（4） 所有生物都共用一套密码子表，只要条件适宜都可以转录翻译进行表达过程。所以人体的生长激素基因也能在细菌体内成功表达。

（5）没有冷凝，培养基还不是液态，没有形成固态。这样就把培养皿平板倒置，会使皿盖冷却水倒流入培养基中。能够在含有氨苄青霉素的培养基上生长的就说明目的基因导入位置不在抗氨苄青霉素基因中间，没有破坏抗氨苄青霉素基因，或者是普通的质粒没有导入成功，两个抗性基因都没被破坏。