题目内容

苦马豆素(SW)最早是从植物灰苦马豆中分离获得,为了研究SW是否具有抑制肿瘤细胞生长的作用,许多学者做了大量研究,请根据以下实验研究过程及研究结果回答问题.
①取小鼠肝癌Hepal-6细胞
②制成单细胞悬液,接种于多孔板,加入等量培养液,每组设5个平行孔
③于37℃、5%CO2培养箱中分别培养24h
④加入等量不同浓度SW溶液,于37℃、5%CO2培养箱中分别培养
⑤分别在24h、48h、72h时吸取培养液,观察结果,得到不同浓度SW对细胞存活率影响曲线(图1)
⑥将培养48h的培养液离心,细胞染色,在荧光显微镜下观察拍照,记录正常细胞和凋亡细胞数目,并采用免疫荧光细胞技术检测细胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2表达量状况,汇总统计结果(表1)
(1)实验中首先将小鼠肝癌Hepal-6细胞制成单细胞悬液,于37℃、5%CO2培养箱中培养的目的是
 
.
(2)实验中对照组的处理方法应为
 
,利用多孔板培养时,每组设置5个平行孔同时进行培养,计数后统计平均值是为了
 
.
(3)分析图1中曲线可知,SW对肝癌Hepal-6细胞作用效果的特点是:
SW(μg/mL) 癌细胞数目 凋亡细胞数目 Bax蛋白 Bcl-2蛋白
2 + ++++ ++++ +
1 ++ +++ +++ ++
0.5 +++ ++ ++ +++
0 ++++ + + ++++
表1培养48h细胞数目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达量情况(注:“+”的数量表示相对值的大小)
①
 
;
②
 
.
(4)表1结果说明SW可以诱发细胞
 
,从分子水平上分析,SW可以导致癌细胞内
 
的合成量增加,该基因表达的过程可以表示为
 
.
考点:动物体细胞克隆
专题:
分析:分析表格:随着SW浓度的增加,癌变的细胞减少,凋亡的细胞增多,可以得出SW可以诱导细胞凋亡;同时,可以看出Bax蛋白随着SW浓度增加而增加,Bcl-2蛋白着SW浓度增加而减少.
分析曲线图:SW浓度越高,对细胞生长(存活)的抑制作用越强;SW作用时间越长,对细胞生长(存活)的抑制作用越强.
解答: 解:(1)动物细胞培养,制成单个细胞,防止接触抑制,给予适宜的环境,使细胞克隆(细胞分裂、细胞增殖),为科研提供足够的材料.
(2)空白对照,不加SW,多组测量为减小误差使实验结果更可信.
(3)相同作用时间,不同SW浓度对小鼠肝癌Hepal-6细胞有抑制,且随着SW浓度增加,抑制作用增强;同一SW浓度,不同作用时间对对小鼠肝癌Hepal-6细胞有抑制,且随着SW作用时间增加,抑制作用增强.
(4)分析曲线图可知:SW浓度越高,对细胞生长(存活)的抑制作用越强;SW作用时间越长,对细胞生长(存活)的抑制作用越强.Bax基因表达的过程可以表示为Bax基因转录形成mRNA,mRNA翻译成Bax蛋白,如图:.
故答案:(1)细胞克隆(细胞分裂、细胞增殖)
(2)不加SW药物(或只加入等量的生理盐水)  减小误差使实验结果更可信
(3)①SW浓度越高,对细胞生长(存活)的抑制作用越强
②SW作用时间越长,对细胞生长(存活)的抑制作用越强
(4)凋亡    Bax蛋白
点评:本题结合图表,考查动物的细胞培养与体细胞克隆,意在考查考生具有对一些生物学问题进行初步探究的能力,具备验证简单生物学事实的能力,并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理.
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