题目内容
如图为转基因烟草培育过程流程图，请回答：
（l）携带外源基因的质粒除了含有外源基因外，还包括 、 、复制原点和标记基因中标记基因的作用是 ，构建携带外源基因的质粒时，需要使用的工具酶是 ．
（2）图中目的基因导人烟草细胞的方法是 ，感染过程是利用农杆菌中Ti质粒上的 ，使外源基因进入并整合到烟草染色体DNA上．此外另一十分简便经济的导人方法是 ．
（3）将含有目的基因的受体细胞培养成烟草植株的技术叫做 ，其理论基础是 ，图中的生根、长芽过程属于 过程．
（4）在培养过程中，除添加必要的营养物质，还需要向培养基中添加 ，同时除提供适宜的温度、光照和氧气等环境条件外，成功的另一关键是 ．
（l）携带外源基因的质粒除了含有外源基因外，还包括
（2）图中目的基因导人烟草细胞的方法是
（3）将含有目的基因的受体细胞培养成烟草植株的技术叫做
（4）在培养过程中，除添加必要的营养物质，还需要向培养基中添加
考点：基因工程的原理及技术,植物组织培养的概念及原理
专题：
分析：基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
解答：
解：（l）基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，其中标记基因的作用是鉴别受体细胞中国是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来；构建基因表达载体时，首先需用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，其次还需用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子．
（2）由图可知，将目的基因导入受体细胞的方法是农杆菌转化法，其原理是：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．将目的基因导入植物细胞的另一十分简便经济的导人方法是花粉管通道法．
（3）将转基因细胞培养成转基因植株还需采用植物组织培养技术，其理论基础是植物细胞具有全能性．植物组织培养包括脱分化和再分化两个重要的步骤，图中的生根、长芽过程属于再分化过程．
（4）决定脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类及比例，因此在培养过程中，除添加必要的营养物质，还需要向培养基中添加植物激素；植物组织培养时除提供适宜的温度、光照和氧气等环境条件外，成功的另一关键是无菌操作．
故答案为：
（1）启动子 终止子 鉴别受体细胞中国是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来 限制酶和DNA连接酶
（2）农杆菌转化法 T-DNA 花粉管通道法
（3）植物组织培养 植物细胞具有全能性 再分化
（4）植物激素 无菌操作
（2）由图可知，将目的基因导入受体细胞的方法是农杆菌转化法，其原理是：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．将目的基因导入植物细胞的另一十分简便经济的导人方法是花粉管通道法．
（3）将转基因细胞培养成转基因植株还需采用植物组织培养技术，其理论基础是植物细胞具有全能性．植物组织培养包括脱分化和再分化两个重要的步骤，图中的生根、长芽过程属于再分化过程．
（4）决定脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类及比例，因此在培养过程中，除添加必要的营养物质，还需要向培养基中添加植物激素；植物组织培养时除提供适宜的温度、光照和氧气等环境条件外，成功的另一关键是无菌操作．
故答案为：
（1）启动子 终止子 鉴别受体细胞中国是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来 限制酶和DNA连接酶
（2）农杆菌转化法 T-DNA 花粉管通道法
（3）植物组织培养 植物细胞具有全能性 再分化
（4）植物激素 无菌操作
点评：本题结合转基因烟草的培育过程图解，考查基因工程和细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各步骤中的相关细节；识记植物组织培养的过程、条件及原理等基础知识，能结合所学的知识准确答题．
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