题目内容

3．烟草花叶病毒（TMV）是一种在烟草及蔬菜等经济作物中广泛传播的病毒，对农业生产造成很大的危害．研究者利用植物基因工程的方法将烟草花叶病毒外壳蛋白基因（CP基因）导入烟草并在转化的烟草植株中表达，使其获得对烟草花叶病毒的抗性．如图是转化烟草植株的培育流程，请回答：

（1）含有CP基因的cDNA文库是通过将TMV的RNA进行反转录获得的．在对cDNA进行PCR扩增时，设计的引物自身不能含有互补序列．
（2）将CP基因导入土壤农杆菌质粒的T-DNA区，其原因是T-DNA可以从农杆菌中转移并稳定整合到植物染色体的DNA中．
（3）含重组质粒的土壤农杆菌与烟草叶共培养前，对烟草叶的处理要求是无菌，并切成小片．
（4）共培养形成愈伤组织时的培养条件是必须避光有光或避光）．
（5）在配置诱导芽、根的培养基时，要注意在不同的培养阶段需调整生长素和细胞分裂素的比例．最终检测转基因是否成功，可用抗原-抗体杂交（或抗病接种实验）方法进行检测．

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）以RNA为模板合成DNA的过程为逆转录过程，故含有CP基因的cDNA文库是通过将TMV的RNA进行反转录获得的．在对cDNA进行PCR扩增时，设计的引物自身不能含有互补序列，否则两引物会互补配对形成双链．
（2）由于土壤农杆菌T-DNA可以从农杆菌中转移并稳定整合到植物染色体的DNA中，故将目的基因CP基因导入土壤农杆菌质粒的T-DNA区．
（3）含重组质粒的土壤农杆菌与烟草叶共培养前，对烟草叶的处理要求是无菌，并切成小片．
（4）共培养形成愈伤组织时的培养条件是必须避光，形成叶绿体时则需要光照．
（5）生长素与细胞分裂素比值较高时有利于生根，较低时有利于生芽，在配置诱导芽、根的培养基时，要注意在不同的培养阶段需调整生长素和细胞分裂素的比例．最终检测转基因是否成功，可用抗原-抗体杂交方法进行检测形成的蛋白质．
故答案为：
（1）反转录   互补
（2）T-DNA区    T-DNA可以从农杆菌中转移并稳定整合到植物染色体的DNA中
（3）无菌，并切成小片
（4）避光
（5）生长素和细胞分裂素     抗原-抗体杂交（或抗病接种实验）

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤的相关细节，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．

练习册系列答案
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下面为某高等生物细胞不同分裂时期的模式图，Ⅰ、Ⅱ表示染色体片段。相关叙述不正确的是（ ）

A．图甲细胞处在减数第二次分裂中期，此时不进行核DNA的复制

B．由图可以看出分裂过程中四分体中的非姐妹染色单体发生了交换

C．图甲所示细胞若继续分裂可能会发生等位基因的分离

D．若两图来源于同一个精原细胞，则图乙是图甲细胞分裂形成的[来源

:

14．一个动作是屈肌群和伸肌群在神经的支配下协调完成的．图表示膝跳反射中枢部分神经元之间的联系，请据图回答有关问题．
（1）A表示传入（传人、传出）神经元的轴突．兴奋在A上以局部电流的形式传导．
（2）兴奋经过突触时发生的信号的转化是电信号→化学信号→电信号．兴奋经过突触时的传递是单向的，原因是神经递质只能由突触前膜释放，作用于突触后膜．
（3）神经递质有兴奋性递质和抑制性递质，兴奋性递质与突触后膜上的受体结合，引起突触后膜钠离子内流，突触后膜的静息电位变为动作电位，突触后神经元兴奋；抑制性递质作用于突触后膜，引起突触后膜上的Cl-内流，突触后膜的膜电位变化是外正内负的电位差更大，突触后神经元被抑制．兴奋由A传来时，图中被抑制的神经元是屈肌运动神经元．
（4）在有意识控制的情况下膝跳反射不能完成，说明大脑皮层可以调控低级的反射活动．
11．如表是某同学在做几个实验时所用的实验材料和实验条件等相关内容，下列有关分析中错误的是（　　）
组别材料实验条件观察内容
Ⅰ豆浆试剂甲颜色反应
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Ⅲ紫色洋葱鳞片叶外表皮0.3g/mL蔗糖溶液质壁分离
Ⅳ洋葱根尖解离液、龙胆紫染液等细胞中染色体的数目及形态
A．4组实验中需要使用显微镜的是Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ
B．Ⅰ组实验所用的试剂甲是双缩脲试剂，观察到的实验结果是溶液变为蓝色
C．Ⅲ组实验中若使用0.3g/mLKNO3溶液，则细胞先发生质壁分离，然后又自动复原
D．Ⅳ组实验中装片制作的流程为解离→漂洗→染色→制片
18．下列关于生物膜结构的探索历程的说法，不正确的是（　　）
A．欧文顿通过对膜成分的提取和鉴定，认识到细胞膜是由脂质组成的
B．科学家通过提取红细胞中的脂质实验，得出结论：膜的脂质分子是双层排布
C．罗伯特森通过电镜观察，提出了生物膜的“蛋白质-脂质-蛋白质”三层结构模型
D．在建立生物膜结构模型的过程中，实验技术起了关键的推动作用
8．如图是表示某种生物个体内的三个正在进行分裂的细胞，请据图回答下列问题：
（1）判断三图各属于时期：甲图表示减数第一次分裂分裂后期细胞．图中有染色体4条，DNA分子8个；在其上一时期有四分体2个．
（2）乙图中有同源染色体4对，其子细胞为体细胞．
（3）丙图细胞分裂形成的子细胞为卵细胞和极体．
（4）该种生物体细胞中染色体4条．
（5）三图中含染色单体的是甲图．
（6）由图分析可知，该种生物是雌性（雌性、雄性）动物．
15．糖链是细胞内除蛋白质、核酸之外的另一类大分子物质，在细胞壁、细胞膜、细胞质中都有分布．下列说法正确的是（　　）
A．糖链都能为细胞生命活动提供能量
B．根据长度不同，糖链可以分为单糖、二糖和多糖
C．糖链是生物体内糖的主要存在形式，如淀粉、糖原都是常见的糖链
D．可用本尼迪特试剂在沸水浴情况下检测糖链的存在
9．促性腺激素释放激素、促甲状腺激素释放激素、促肾上腺素作用的器官分别是（　　）
A．性腺、甲状腺、肾上腺B．垂体、甲状腺、肾上腺
C．垂体、垂体、垂体D．垂体、垂体、肾上腺
10．关于DNA分子的结构与复制的叙述中，正确的是（　　）
①复制后的DNA分子组成同源染色体；
②在一个双链DNA分子中，G+C占碱基总数的M%，那么该DNA分子的每条链中G+C都占该链碱基总数的M%；
③DNA分子相邻碱基通过脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖连接；
④DNA双链被32P标记后，复制n次，子代DNA中有标记的占$\frac{1}{2n}$．
A．②B．②③C．③④D．①④

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