Question

14．利用微生物分解淀粉生产糖浆具广阔的应用前景．某同学为了从长期种植马铃薯的土壤中分离出能够高效分解淀粉的细菌，进行了如下实验．
（1）实验步骤：
①配制以淀粉为碳源的固体培养基，为了使培养基凝固成固体，应该向培养基中加入的物质是琼脂．
②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间后，培养基上出现菌落．
③将接种针用灼烧灭菌法灭菌后，从②中的培养基上挑取一定量细菌，接种入液体（固体、液体）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖．
④配制与①相同的培养基，并加入少量碘液，使培养基呈蓝紫色．用稀释涂布平板法法将上一步大量繁殖后的细菌接种到已灭菌的培养基上．
⑤培养一段时间后，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小．周围出现较大的透明圈现象的菌落即为初选菌落，经进一步分离、纯化后即可达到实验目的．
（2）上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于选择培养基，⑤所用培养基属于鉴别培养基．

Answer 1

分析 1、培养基按功能分：

种类	制备方法	特征	用途
选择培养基	培养基中加入某种化学成分	根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率	加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
鉴别培养基	加入某种试剂或化学药品	依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计	鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌

2、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
3、消毒和灭菌

	消毒	灭菌
概念	使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法	灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象	操作空间、某些液体、双手等	接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

解答 解：（1）实验步骤：
①要分离出能够高效分解淀粉的细菌，应该配制以淀粉为碳源的固体培养基；为了使培养基凝固成固体，应该向培养基中加入琼脂．
②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间后，培养基上出现单个细菌繁殖而成的菌落．
③金属的接种工具使用灼烧灭菌法灭菌．淀粉分解菌属于异养需氧型微生物，需要将其接种到液体培养基进行摇床震荡培养．
④淀粉分解菌的鉴定需要将其用稀释涂布平板法接种到已灭菌的培养基上．
⑤淀粉遇到碘液会变蓝色，在固体平板培养基上，淀粉分解菌能够将淀粉分解而使得以淀粉分解菌菌落为中心的非蓝色的透明圈．出现透明圈的就是淀粉分解菌，经进一步纯化培养可达到实验目的．
（2）从用途分析，①所用培养基属于选择培养基，⑤所用培养基属于鉴别培养基．
故答案为：
（1）①淀粉    琼脂    ②菌落    ③灼烧灭菌    液体    ④稀释涂布平板法     ⑤透明圈
（2）选择      鉴别

点评 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记接种微生物常用的两种方法；识记培养基的种类及作用；识记无菌技术，能结合所学的知识准确答题．