Question

【题目】回答下列生物科技及其实践的相关问题：

（1）培育转基因抗虫棉时为构建重组DNA分子通常要用同种限制酶分别切割__________________和__________。将重组DNA转入农杆菌时，可以用________处理农杆菌，使重组DNA易于导入。

（2）科学家利用番茄叶细胞和马铃薯叶细胞杂交培育“番茄—马铃薯”植株的过程中，首先要____________________酶解除去植物细胞的细胞壁，以使植物原生质体相互分离；在动物细胞培养技术中，使细胞分离开来的酶是________。

（3）进行早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和________。

（4）分离细菌时通常用固体培养基，原因是__________________________________。与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和__________，这些植物激素一般需要事先单独配制成________保存备用。使用过的培养基及其培养物必须经过________处理后才能丢掉，以防止培养物的扩散。

（5）一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，若用___________测试，流出物呈________________色表明水解产物糊精生成。

Answer 1

【答案】 含目的基因的DNA片段 Ti质粒 CaCl2 纤维素酶和果胶 胰蛋白酶 血清 固体培养基容易形成固定的菌落，便于进行筛选 细胞分裂素 母液 灭菌 淀粉指示剂溶液 红

【解析】试题分析：基因工程的一般操作步骤有：目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达．其中获取的目的基因常用PCR技术进行扩增；基因工程的工具酶有限制酶和DNA连接酶，通常要用同一种限制酶分别切割质粒和含目的基因的DNA片段，然后再用DNA连接酶连接成重组质粒。在植物基因工程中，常利用植物的组织培养技术将植物受体细胞培养为完整植株，此过程中生长素和细胞分裂素的比例至关重要。

（1）基因工程中，构建基因表达载体需要用同一种限制酶对目的基因（含目的基因的DNA片段）和运载体（Ti质粒）进行切割，然后用DNA连接酶进行连接。将重组DNA转入农杆菌时，需要对大肠杆菌用氯化钙处理，使其成为感受态，便于导入。

（2）植物体细胞杂交过程中，先用纤维素酶和果胶酶将植物细胞壁去掉，获得原生质体；动物细胞培养过程中，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，将细胞分散开来。

（3）早期胚胎培养的培养液成分有：无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。

（4）固体培养基容易形成固定的菌落，便于进行筛选，所以分离细菌时通常用固体培养基；植物组织培养的培养基常需添加生长素和细胞分裂素，由于不同的过程两种激素的比例不同，所以这些植物激素一般需要事先单独配制成母液保存备用。使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢掉，以防止培养物的扩散。

（5）淀粉水解后，用淀粉指示剂溶液测试，流出物呈红色表明水解产物糊精生成。