Question

【题目】【选修3:现代生物技术】

埃博拉病毒（EBO）呈纤维状，病毒衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别。科研人员利用该病毒进行了一系列的研究。请回答下列问题：

（1）用GP蛋白作为疫苗比较安全，其原因是________________。

（2）生产疫苗过程中首先要获得编码GP蛋白抗原的基因，方法是先提取出病毒的RNA，再将RNA________，要大量获得该基因，可釆用PCR技术进行扩增，该项技术中需要用到__________酶，该酶需从__________的末端开始催化子链的延伸。

（3）在基因导入牛受体细胞前，基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的________，才能驱动转录过程。转基因牛是否培育成功，可以通过________________技术从分子水平进行检测。

（4）科研人员也可以利用经EBO免疫后小鼠的_____________与鼠的瘤细胞进行融合成杂交瘤细胞，培养后可以获得纯净的单一品种抗体，其特点是________________，可以用此抗体与药物制成“生物导弹”，抗击EBO。

Answer 1

【答案】 GP蛋白自身没有感染能力 逆转录合成DNA 耐高温的DNA聚合（Taq酶） 引物 （乳腺蛋白基因的）启动子 抗原—抗体杂交 B淋巴细胞 特异性强、灵敏度高、并可能大量制备

【解析】试题分析：基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．基因表达载体的组成包括：目的基因、启动子、终止子和标记基因等；目的基因导入动物细胞的方法是显微注射法；检测转基因生物目的基因是否表达--抗原-抗体杂交技术。单克隆抗体的制备流程：人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，通过培养获得的杂交瘤细胞得到单克隆抗体。

（1）用GP蛋白作为疫苗比较安全，其原因是GP蛋白自身没有感染能力，但是保留有抗原性。

（2）RNA在逆转录酶的催化下，逆转录成相应的DNA。PCR技术需要耐高温的DNA聚合（Taq酶）的催化，该酶需从引物的末端开始催化子链的延伸。

（3）基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的启动子，才能驱动转录过程。转基因牛是否培育成功，可以通过抗原-抗体杂交技术从分子水平进行检测。

（4）科研人员利用经EBO免疫后小鼠的B淋巴（效应B或浆）细胞与鼠的瘤细胞进行杂交，筛选后进一歩培养的是杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生单一抗体，又能在体外快速增殖。单克隆抗体具备的特点特异性强、灵敏度高、并可能大量制备。