Question

科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗．其技术流程如图，请回答相关问题：

（1）过程①获得重组胚胎之前需要通过

 

技术获得重组细胞，接受细胞核的去核卵母细胞应该处于

 

时期．
（2）步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其

 

分离出ES细胞．步骤③中，需要构建含有干扰素基因的

 

．构建之前可以利用

 

技术对目的基因进行扩增．
（3）将基因导入ES细胞常用的方法是

 

．体外诱导ES细胞向不同方向分化是利用了ES细胞的

 

．
（4）为检测干扰素基因的表达情况，可采用

 

方法，若有杂交带出现，表明目的基因已成功表达．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,胚胎干细胞的研究与应用

专题：

分析：分析题图：图示是利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的流程，其中①表示获得重组胚胎的过程；②表示早期胚胎培养过程；③表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞．

解答： 解：（1）过程①获得重组胚胎之前需要通过核移植技术获得重组细胞，接受细胞核的去核卵母细胞应该处于MⅡ期．
（2）ES细胞可以从囊胚的内细胞团中分离出来．将目的基因导入受体细胞前，需要构建含有目的基因（干扰素基因）的表达载体．PCR技术可在体外大量扩增目的基因．
（3）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法．体外诱导ES细胞向不同方向分化是利用了ES细胞的全能性．
（4）为检测目的基因的表达情况，可采用抗体-抗原杂交技术，若有杂交带出现，表明目的基因已成功表达．
故答案为：
（1）核移植     MⅡ
（2）内细胞团      表达载体    PCR
（3）显微注射     全能性
（4）抗体-抗原杂交

点评：本题结合利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的流程图，综合考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记细胞工程的操作步骤及相关细节；识记核移植技术的过程及应用；识记胚胎干细胞的来源及特点，能结合所学的知识准确答题．