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43.(7分)制备转基因克隆动物多是以易于核移植的胚胎成纤维细胞(EF)作为核供体。转入人生长激素基因的鼠胚胎成纤维细胞(tEF)不能分泌人生长激素,推测其不具备相应的细胞质条件而影响了基因表达,从而影响了对转基因细胞的筛选。为快速筛选出这类细胞,研究者设计了如图17所示的大致流程,据此回答问题:

(1)杂合细胞可以分泌人生长激素,说明该细胞具备分泌生长激素的______条件。

(2)这一分泌现象说明指导人生长激素合成的基因来自于___细胞,分泌生长激素的条件由____细胞提供。

(3)培养和诱导融合等操作均需在严格的____环境条件下操作,且配制的合成培养基通常需要加入_____等一些天然成分。

(4)生长激素的化学本质是_____,所以可以采用_____方法检测杂种细胞的分泌量。

【答案】

43.(7分)

(1)细胞质   

(2)转基因的胚胎成纤维细胞或Tef(只答EF不得分)      乳腺癌

(3)无菌、无毒      血清(血浆)        

(4)蛋白质       抗原抗体杂交

【解析】转基因的胚胎成纤维细胞与乳腺癌细胞融合,形成的杂合细胞能够分泌人的生长激素,考查了培养和诱导细胞的融合条件、所需培养基,生长激素的化学本质、检测杂种细胞的分泌量使用的方法。

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(每空1分,共10分)我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出,这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图,请据图回答:
 
(1)一个完整的基因表达载体除了带有绿色荧光蛋白基因以外,还必须含有复制原点、启动子、终止子和________
__________。启动子是一段有特殊结构的DNA片段,它是___________酶识别和结合的部位;而起始密码子的化学本质则是________(DNA/RNA)。(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞后,要通过DNA分子杂交技术,来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的__________________上。
(3)从猪中取胎儿成纤维细胞,用__________________处理,然后进行分散培养。培养时,将培养瓶置于含________________________________的混合气体培养箱中进行培养。
(4)过程④表示通过显微操作法吸出卵母细胞中的细胞核,微型吸管除了将细胞核吸除外,往往还要将__________________一并吸出。
(5)去核的卵母细胞与成纤维细胞通过电刺激后融合,形成重组细胞。利用物理或化学方法刺激重组细胞,使之完成细胞______________________________,在体外培养成重组早期胚胎。
(6)在进行过程⑦操作前,应用激素对受体母猪进行__________________处理。
(7)本实验所用到的现代生物科学技术有____________________________(填序号)。
A.动物细胞培养                       B.胚胎移植
C.胚胎细胞核移植                     D.DNA重组技术

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