题目内容
【题目】苏云金杆菌能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图，据图回答下列问题。
（1）将图中①的DNA和质粒用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，过程②需要用到 酶。
（2）假设图中质粒上BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ识别位点的碱基序列，现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，那么该图中①的DNA右侧还能选择BamHⅠ进行切割吗？ （填“能”或“不能”）。若上述假设成立，并成功形成重组质粒，则重组质粒__________（填“能”或“不能”）被BamHⅠ切开，_________（填“能”或“不能”）被HindⅢ切开。
（3）实际操作中最常用_____________法来获得转基因植物，种植转基因植物，它所携带的目的基因可能传递给非转基因植物，造成基因污染，把目的基因导入植物的_______DNA中，就可以有效避免基因污染，原因是_______________。
【答案】（1）DNA连接酶
（2）能 能 不能
（3）农杆菌转化法 叶绿体（线粒体/细胞质） 叶绿体（线粒体/细胞质）中的基因不会通过花粉传给下一代
【解析】（1）由题意可知过程②是构建基因表达载体，要将目的基因和运载体相连，所以应用DNA连接酶。
（2）由酶切位点识别序列可知BclI切割后会产生-GATC的黏性末端，能和BamHI切割的黏性末端进行配对，所以能。该重组质粒连接后仍然是GGATCC，所以能被BamHI切开。但不能再被HindIII切开。
（3）实际操作中最常用农杆菌转化法来获得转基因植物，要防止基因污染应将目的基因导入到植物的线粒体或叶绿体的DNA中，因为受精时只有精子的细胞核与卵细胞结合，所以这样就不会通过花粉传递给下一代。
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