Question

5．有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株．回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以原油为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于选择培养基．
（2）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力强．
（3）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌．无菌技术要求试验操作应在酒精灯火焰附近进行，以避免周围环境中微生物的污染．
（4）分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，使培养基的碱性增强．利用这一原理对菌种进行鉴定，方法是在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，说明该种细菌能够分解尿素．
（5）某同学用稀释涂布平板法测定水样中的大肠杆菌的含量时，在3个平板上用稀释涂布平板法接入稀释倍数为10⁴稀释液0.2mL，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为51、52和53．则每升水样中大肠杆菌数为2.6×10⁹．

Answer 1

分析 （1）培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐．培养基的分类：①按物理性质分，分为液体培养基和固体培养基，固体培养基中含有凝固剂，一般是琼脂．②按化学成分分，分为天然培养基和合成培养．两者的区别是天然培养基成分不确定，合成培养基成分的含量是确定的．③按用途分，分为选择培养基和鉴别培养基．选择培养基主要是培养、分离特定的微生物，培养酵母菌可在培养基中加入青霉素；鉴别培养基可以鉴定不同的微生物，比如鉴别饮用水中是否含有大肠杆菌，可以用伊红-美蓝培养基，如果菌落呈深紫色，并带有金属光泽，说明有大肠杆菌．
（2）常用灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法．
培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次：高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒法．
（3）接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体--菌落．

解答 解：（1）欲筛选出能降解原油的菌株，培养基中应只含有原油而无其它碳源，不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存，这类培养基属于选择培养基．
（2）降解原油能力越强的菌株，在菌落周围形成的分解圈越大．
（3）实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌（如接种环）、干热灭菌（如培养皿）、高压蒸汽灭菌（如培养基）等．无菌操作要求在整个实验过程中操作都在酒精灯火焰附近进行，以避免周围微生物的污染．
（4）分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，使培养基的碱性增强．利用这一原理对菌种进行鉴定，方法是在以尿素为唯一氮源的培养基中加入 酚红 指示剂培养细菌，若指示剂变红，说明该种细菌能够分解尿素．
（5）某同学用稀释涂布平板法测定水样中的大肠杆菌的含量时，在3个平板上用稀释涂布平板法接入稀释倍数为10⁴稀释液0.2mL，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为51、52和53．则每升水样中大肠杆菌数为（51+52+53）÷3÷0.2×10⁴×10³=2.6×10⁹．
故答案为：
（1）原油    选择        
（2）强
（3）干热灭菌   高压蒸汽灭菌    酒精灯火焰
（4）尿素    酚红   该种细菌能够分解尿素
（5）2.6×10⁹

点评 本题主要考查微生物培养的一些基本操作，意在加深学生对相关知识点的识记与理解．