Question

15．下列对基因工程的四大操作步骤的理解有错误的一项是（　　）

• A． 限制性内切酶主要存在于原核生物体内，识别位点具有特异性
• B． DNA连接酶是恢复被切开的两个脱氧核苷酸之间的化学键
• C． 目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等
• D． 目的基因的检测与鉴定应在导入受体细胞之前进行

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：A、限制性内切酶主要存在于原核生物体内，识别位点具有特异性，A正确；
B、DNA连接酶是恢复被切开的两个脱氧核苷酸之间的化学键--磷酸二酯键，B正确；
C、目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等，C正确；
D、目的基因的检测与鉴定应在导入受体细胞之后进行，D错误．
故选：D．

点评 本题考查基因工程的相关知识，重点考查基因工程的操作工具及操作步骤，要求考生识记三种操作工具的作用；掌握操作步骤及其细节，能结合所学的知识准确判断各选项．