Question

【题目】黑麦草具有抗除草剂草甘麟的能力，是因为黑麦草拥有编码抗草甘麟酶的基因．科学家利用该基因．通过转基因技术获得了抗除草剂草甘磷的玉米新品种．培育新品种过程中用到了PCR技术（如图所示），请回答下列问题：
（1）通过反转录法得到文库，从中选取抗草甘磷酶的基因．该方法获得的目的基因缺少基因表达所需的调控序列，即和 ．
（2）体外获得大量编码抗草甘麟酶的基因要利用PCR技术，该技术所依据的原理为 ， 图中物质A是 ， B酶是 ． PCR中A不能过短，主要原因是 ．
（3）加热变性是使DNA双链打开，这一步是打开键．在细胞内断此键用 酶．
（4）若需要对转入抗草甘麟基因的玉米进行个体生物学水平的鉴定，需要对玉米做实验．
（5）若实验结果不理想，为了提高抗草甘麟酶活性，可以通过工程设计和改造编码抗草甘麟酶的基因．
（6）第四轮循环产物中含有A的DNA片段所占的比例为 ．
（7）PCR扩增中，理论上要获得等长的DNA片段，至少要扩增到第次．

Answer 1

【答案】
（1）cDNA；启动子；终止子
（2）DNA双链复制；引物；Taq酶；过短，特异性差，会与模板随机结合
（3）氢；解旋
（4）抗草甘麟接种
（5）蛋白质
（6）
（7）三
【解析】解：（1）组织细胞中由于基因的选择性表达，因此通过反转录法得到是cDNA文库，从中选取抗草甘磷酶的基因．由于mRNA是由基因的编码区转录而来，该方法获得的目的基因缺少基因表达所需的调控序列，即非编码区的启动子和终止子．（2）PCR技术所依据的原理为DNA双链复制，图中物质A是引物，B酶是Taq酶．PCR中引物不能过短，过短，特异性差，会与模板随机结合．（3）加热变性是使DNA双链打开，这一步是打开氢键．在细胞内断氢键用解旋 酶．（4）若需要对转入抗草甘麟基因的玉米进行个体生物学水平的鉴定，需要对玉米做抗草甘麟接种实验．（5）若实验结果不理想，为了提高抗草甘麟酶活性，可以通过蛋白质工程设计和改造编码抗草甘麟酶的基因．（6）由图可知，由原来的每条母链为模板合成的两个新DNA分子中，只含有引物A或另一种引物，而以新合成的子链为模板合成新DNA分子时，两种引物都含有，第四轮循环共产生16个DNA分子，其中含有引物A的分子是15个，占 ．（7）由图示可知，第一、二轮循环合成的子链长度均不同，根据半保留复制特点可知，前两轮循环产生的四个DNA分子的两条链均不等长，第三轮循环产生的DNA分子存在等长的两条核苷酸链，如分析中的图示． 所以答案是：（（1）cDNA；启动子；终止子；（（2）DNA双链复制；引物；Taq酶 过短，特异性差，会与模板随机结合；（（3）氢；解旋；（（4）抗草甘麟接种；（5）蛋白质；（6） ；（7）三
【考点精析】认真审题，首先需要了解基因工程的原理及技术(基因工程的原理是利用DNA重组技术)，还要掌握蛋白质工程(蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求)的相关知识才是答题的关键．