题目内容
15．在菲律宾首都马尼拉郊外的一片稻田里，一种被称为“金色大米”的转基因水稻已经悄然收获．这种转基因大米可以帮助人们补充每天必需的维生素A．由于含有可以生成维生素A的β胡萝卜素，它呈现金黄色泽，故称“金色大米”．“金色大米”的培育流程如图所示，请回答下列问题．（已知酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-）．
（1）培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中，其核心是基因表达载体的构建，通过该操作形成了图中的c（填字母），它的构成至少包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等．
（2）在研究过程中获取了目的基因后采用PCR技术进行扩增．在构建c的过程中目的基因用限制酶Ⅱ（填“限制酶Ⅰ”或“限制酶Ⅱ”）进行了切割．检验重组载体导入能否成功，需要利用基因I作为标记基因．过程d通常采用农杆菌转化法．
分析 分析图解：图中a表示转录过程，b表示利用mRNA进行逆转录合成目的基因，c表示基因表达载体的构建，d表示目的基因导入受体细胞，e是水稻细胞进行植物的组织培养并筛选出符合要求的植株．目的基因的两侧分别有-GGATCC-、-GATC-两种序列，根据两种酶的酶切位点，限制酶Ⅰ只能切割左侧的序列，而限制酶Ⅱ可以切割两侧的序列．
解答 解：（1）基因工程操作四步曲中的核心步骤是基因表达载体的构建．图中c称作基因表达载体（或重组质粒，重组DNA分子），它的构成除了复制原点、目的基因外，还必须有启动子、终止子、标记基因等．
（2）在研究过程中获取了目的基因后采用PCR技术进行扩增．据图分析，目的基因的两侧有-GGATCC-、-GATC-两种序列，由于酶I的识别序列和切点是一G↓GATCC一酶II的识别序列和切点是一↓GATC-，因此只能选择限制酶Ⅱ获取目的基因．图中可以看出目的基因插入到基因Ⅱ中，因此检验重组载体导入能否成功，需要利用基因I作为标记基因．将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法．
故答案为：
（1）基因表达载体的构建 c 目的基因、启动子、终止子、标记基因
（2）PCR 限制酶Ⅱ基因I 农杆菌转化
点评 本题具有一定的综合性，难度适中，考查基因工程中目的基因的获取、基因表达载体的构建、限制酶、植物组织培养技术、蛋白质工程等方面的知识，要求考生能识记基因工程技术的操作步骤，以及限制酶的作用特点，培养了考生识图能力和审题能力．
练习册系列答案
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如图为豌豆的一对相对性状遗传实验过程图解，请仔细阅图后回答下列问题：
4．下列关于免疫调节的叙述，正确的是（ ）
| A． | 病毒侵入人体后，机体可产生相应浆细胞和效应T细胞 | |
| B． | 浆细胞能增殖分化成具有分裂能力的记忆细胞 | |
| C． | 记忆细胞可与再次入侵的病原体结合，从而直接抑制病原体的繁殖 | |
| D． | 抗体或淋巴因子与抗原特异性结合后被吞噬细胞吞噬、分解 |
10．结合图，判断下列有关基因工程的工具酶功能的叙述，不正确的是（ ）
| A． | 切断 a处的酶为限制性核酸内切酶 | B． | 连接 a处的酶为DNA连接酶 | ||
| C． | 切断 b处的酶为解旋酶 | D． | 切断 b处的为限制性核酸内切酶 |
