Question

16．科学家将绿色荧光蛋白（GFP）基因转入小鼠胚胎干细胞（ES）内，GFP基因若表达就会使细胞带有绿色荧光，继而利用带有绿色荧光的ES细胞培育出嵌合型的小鼠沼于科学研究，流程如图所示．请回答：

（1）在步骤①中构建基因表达载体时，需要在GFP基因的首端加入启动子，RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动GFP基因转录出mRNA，最终获得GFP．GFP基因的尾端还需有终止子，使转录在需要的地方停止下来．
（2）步骤②的受体细胞是小鼠ES细胞，ES细胞一般从囊胚的内细胞团分离得到．在培养ES细胞时，细胞充满培养皿底部后停止分裂，这种现象称为接触抑制．如果想继续培养则是需要重新用胰蛋白酶处理，然后分瓶继续培养，这样的培养过程通常被称为传代培养．
（3）图中重组囊胚在步骤⑤之前要先检测是否有绿色荧光细胞，再通过胚胎移植技术移入代孕母鼠子宫内继续发育．

Answer 1

分析 分析题图：图示为是转基因绿色荧光嵌合小鼠的培育过程，其中①表示基因表达载体的构建过程；②表示将目的基因导入受体细胞的过程；③表示受精作用；④表示早期胚胎发育过程；⑤表示胚胎移植过程；⑥表示妊娠产生转基因鼠的过程．

解答 解：（1）构建基因表达载体时，基因表达载体的组成中必需要有启动子，故在GFP基因的上游必须加入启动子，该核苷酸序列是RNA聚合酶识别和结合的部位．GFP基因的尾端还需有终止子，使转录在需要的地方停止下来．
（2）步骤②的受体细胞是小鼠ES细胞，ES细胞一般从囊胚的内细胞团分离得到．在培养ES细胞时，细胞充满培养皿底部后停止分裂，这种现象称为接触抑制．要继续培养，需要重新用胰蛋白酶处理，然后分瓶继续培养，这样的培养过程通常被称为传代培养．
（3）图中重组囊胚在步骤⑤之前要先检测是否有绿色荧光细胞，再通过胚胎移植技术移入代孕母鼠子宫内继续发育．
故答案为：
（1）启动子     RNA聚合    终止子
（2）内细胞团     接触抑制     胰蛋白酶
（3）绿色荧光细胞       胚胎移植

点评 本题结合转基因鼠的培育过程示意图，考查了基因工程、动物细胞工程、胚胎工程等多个现代生物技术，意在考查考生的识记能力和综合运用能力．