题目内容
【题目】X-连锁重症联合免疫缺陷是一种单基因遗传病，患者缺乏特异性免疫机能。研究人员尝试对20名患病儿童进行基因治疗。他们提取并培养患者的造血干细胞，然后利用逆转录病毒载体将正常基因插入细胞的染色体中，最后将改造后的造血干细胞移植给患者。这些患者的免疫缺陷被治愈了，但有5名儿童罹患了白血病。回答下列问题：
（1）逆转录病毒载体是对天然逆转录病毒改造获得的，改造时要破坏逆转录病毒的外壳蛋白基因等对细胞有害的基因，增加________酶作用位点和________基因。
（2）利用_______________技术可以检测正常基因是否已成功插入细胞的染色体中。
（3）研究人员在培养造血干细胞过程中，需将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中，CO2的主要作用是______。培养过程中应定期更换培养液，目的是________________。
（4）与用捐赠者的造血干细胞进行移植相比，基因治疗的优点是_________。但基因治疗也有一定的风险，例如上文中患儿白血病的致病原因是_____________。
【答案】限制 标记 DNA分子杂交 维持培养液的pH 清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害 不会发生免疫排斥 外源基因插入原癌基因（或抑癌基因）中导致细胞癌变
【解析】
本题文利用的相关知识：逆转录病毒载体是基因工程中基因表达载体，载体需要具备有一个至多个限制酶切割位点、有特殊的标记基因等条件；可以利用DNA分子杂交等技术检测目的基因；基因治疗的优点是不会发生免疫排斥。以此解答问题。
（1）作为运载体需要具备能自我复制；有一个至多个限制酶切割位点；有特殊的标记基因等条件。依据题文可知，改造逆转录病毒基因时，需要增加限制酶作用位点和标记基因。
（2）根据目的基因的检测和鉴定可知，检测正常基因是否已成功插入细胞的染色体中，应该用DNA分子杂交技术。
（3）培养造血干细胞过程中，需将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中，CO2的主要作用是维持培养液的pH，从而为细胞内酶的活性提供适宜的pH条件。培养过程中应定期更换培养液，目的是清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。
（4）依识记内容可知，基因治疗的优点是不会发生免疫排斥反应。癌变是原癌基因或抑癌基因突变的结果，题文中患儿白血病的致病原因是外源基因插入原癌基因（或抑癌基因）中导致基因突变从而细胞癌变。
