题目内容

16．供体细胞的抗原决定基因能编码抗原或与抗原形成的关的酶，导致器官移植过程中出现免疫排斥．科学家利用基因工程方法对猪的基因组进行改造，以解决人体移植器官的短缺和免疫排斥问题．回答下列问题：
（1）对猪基因组进行改造，可以选择某种有调控作用的目的基因，重组后导入爱体细胞，以达到抵制猪抗原决定基因表达（转录/转录和翻译/编码抗原/编码与抗原形成有关的酶）的目的．进行DNA重组时需要使用的工具酶是限制酶DNA连接酶．
（2）选择猪胚胎干细胞作为受体细胞，胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞．将目的基因导入后，利用标记基因的作用筛选（鉴定/选择）含有目的基因的受体细胞．
（3）将含有目的基因的胚胎干细胞注入猪囊胚，而后将囊胚通过胚胎移植技术移入受体子宫，获得转基因猪．
（4）采用核移植技术克隆转基因猪时，应选用处于MII中（减数第二次分裂中期）期的卵母细胞作为受体细胞；随后从构建的重组胚胎中分离得到胚胎干细胞，经诱导分化形成多种器官，这是利用了胚胎干细胞的发育的全能性（全能性/分裂、分化能力/可以被诱导分化形成新的组织细胞特性）．

分析 1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
2、胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）．胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性，体积较小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物任何一种组织细胞．另一方面，在体外培养条件下，ES细胞可不断增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可以进行某些遗传改造．

解答 解：（1）对猪基因组进行改造，可以选择某种有调控作用的目的基因，重组后导入爱体细胞，以达到抵制猪抗原决定基因表达的目的，采用转基因猪的器官进行移植时就不会发生免疫排斥反应．构建基因表达载体时，首先需要用同种限制酶切割外源DNA分子和运载体，其次还需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA分子．
（2）胚胎干细胞是从早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞．标记基因的作用是筛选含有目的基因的受体细胞．
（3）将含有目的基因的胚胎干细胞注入猪囊胚，而后将囊胚通过胚胎移植技术移入受体子宫，获得转基因猪．
（4）采用核移植技术克隆转基因猪时，应选用处于MII中（减数第二次分裂中期）期的卵母细胞作为受体细胞；胚胎干细胞具有发育的全能性．
故答案为：
（1）表达（转录/转录和翻译/编码抗原/编码与抗原形成有关的酶）  限制酶 DNA连接酶 
（2）早期胚胎  原始性腺  筛选（鉴定/选择）
（3）胚胎移植
（4）MII中（减数第二次分裂中期）   发育的全能性（全能性/分裂、分化能力/可以被诱导分化形成新的组织细胞特性）

点评 本题考查基因工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节；识记胚胎干细胞的来源及特点，掌握相关工程技术的应用，能结合所学的知识准确答题．

练习册系列答案
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A．26% B．24%

C．14% D．11%
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