题目内容

9.线粒体是与细胞凋亡密切相关的细胞器.为研究蛋白B对家蚕细胞凋亡的影响,科研人员做了如下实验.
(1)细胞色素c是线粒体内膜上的重要电子传递体,参与有氧呼吸第三阶段的生化反应.细胞受到凋亡信号的作用后,线粒体膜上的非特异性通道打开,引起线粒体膜的(离子)通透性发生改变,线粒体膜两侧离子(和质子)的分布发生变化,导致线粒体膜电位下降或消失,使得细胞色素c 释放出来,引发细胞凋亡.
(2)用生物碱H处理悬浮培养的家蚕细胞,处理不同时间后,用凝胶电泳方法测定细胞溶胶(细胞质基质)中细胞色素c的含量,结果如图所示.

①由于细胞中微管蛋白的表达量相对稳定(且丰富),在实验中可作为标准物质,以校准和消除由于细胞培养操作、细胞取样量和细胞色素c的检测方法等无关变量对实验结果的影响.
②据图分析,正常细胞的细胞溶胶中没有(或“未能”)检测到细胞色素c,由细胞溶胶中细胞色素c含量增加,分离的线粒体中细胞色素c含量下降判断,随着生物碱H 处理时间延长,细胞色素c逐渐释放到细胞溶胶中.
(3)为研究蛋白B的功能,科研人员构建蛋白B基因过量表达载体和蛋白B基因表达干扰载体,导人悬浮培养的家蚕细胞中,用生物碱H处理转基因家蚕细胞,检测到过量表达蛋白B的细胞溶胶中细胞色素c的释放量减少,抑制蛋白B基因表达的细胞溶胶中细胞色素c的释放量显著增加,推测蛋白B抑制细胞色素c的释放,进而抑制细胞凋亡.

分析 1、有氧呼吸的过程中,催化[H]氧化为H2O的过程是有氧呼吸的第三阶段,其场所是线粒体内膜.
2、变量:实验过程中可以变化的因素称为变量,包括自变量、因变量和无关变量;自变量是想研究且可人为改变的变量称为自变量;因变量是随着自变量的变化而变化的变量称为因变量; 无关变量是在实验中,除了自变量外,实验过程中存在一些可变因素,能对实验结果造成影响,这些变量称为无关变量.
3、基因工程的基本操作步骤主要包括目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定四步.

解答 解:(1)有氧呼吸第三阶段的场所是线粒体内膜,由细胞色素c是线粒体内膜上的重要电子传递体,可推测细胞色素c参与有氧呼吸第三阶段的生化反应;细胞受到凋亡信号的作用后,线粒体膜上的非特异性通道打开,会引起线粒体膜的(离子)通透性发生改变,线粒体膜两侧离子(和质子)的分布发生变化,导致线粒体膜电位下降或消失,使得细胞色素c 释放出来,引发细胞凋亡.
(2)①在用生物碱H处理悬浮培养的家蚕细胞,处理不同时间后,用凝胶电泳方法测定细胞溶胶(细胞质基质)中细胞色素c的含量的实验中,由于细胞中微管蛋白的表达量相对稳定(且丰富),所以在实验中可作为标准物质,以校准和消除由于细胞培养操作、细胞取样量和细胞色素c的检测方法等无关变量对实验结果的影响.
②分析题图可知,正常细胞的细胞溶胶中没有(或“未能”)检测到细胞色素c,而据细胞溶胶中细胞色素c含量增加,分离的线粒体中细胞色素c含量下降可判断,随着生物碱H处理时间延长,细胞色素c逐渐释放到细胞溶胶中.
(3)为研究蛋白B的功能,科研人员构建蛋白B基因过量表达载体和蛋白B基因表达干扰载体,导人悬浮培养的家蚕细胞中,用生物碱H处理转基因家蚕细胞,检测到过量表达蛋白B的细胞溶胶中细胞色素c的释放量减少,而抑制蛋白B基因表达的细胞溶胶中细胞色素c的释放量会显著增加,据此可推测蛋白B抑制细胞色素c的释放,进而抑制细胞凋亡.
故答案为:
(1)三    (离子)通透    离子(和质子)
(2)①相对稳定(且丰富)    检测方法   
②没有(或“未能”)    细胞溶胶中细胞色素c含量增加,分离的线粒体中细胞色素c含量下降
(3)生物碱H    抑制细胞色素c的释放,进而抑制细胞凋亡

点评 本题以为了研究蛋白B对家蚕细胞凋亡的影响,科研人员所作的实验为题材,考查细胞结构和功能、基因工程操作步骤等知识,考生识记细胞结构和功能、明确基因工程的操作步骤是解题的关键.

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