Question

16．为从土壤中筛选能有效降解有机化合物X的细菌，研究人员用化合物X、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出能高效降解化合物X的细菌（目的菌）．下图是从土壤中筛选出该细菌的过程示意图，下表是分离纯化的结果．请回答下列问题：
记录项目：透明圈直径/菌落直径

菌落编号	1	2	3
48小时	1.6	2.8	3.0
72小时	2.2	1.2	5.0
96小时	2.3	1.2	4.2

（1）培养基中的有机化合物X主要为目的菌提供碳源（或氮源、碳源）等营养要素．从土壤中富集能有效降解有机化合物X的细菌时，应选用液体（填“固体”或“液体”）培养基．
（2）配制成10^-1浓度稀释液时，用无菌移液管从富集液的上清液中吸取1mL，移人盛有9 mL无菌水的试管中，并依次配制10 ^-2～10 ^-10的梯度稀释液．
（3）在分离、纯化过程中，图中②、③过程接种的方法分别为稀释涂布平板法、平板划线法在倒平板前，应对玻璃器皿和培养基灭菌，灭菌方法是高压蒸汽灭菌法．
（4）分析菌种的分离纯化结果，应选择为3号菌落进行扩大生产，原因是透明圈直径/菌落直径越大，降解化合物X的能力越强．
（5）实验过程中还需配制空白培养基作为对照，其目的是检验培养基和平板的灭菌是否合格．

Answer 1

分析 （1）实验室中目的菌株的筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度．pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长．
（2）常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法．
（3）据图分析：①是梯度稀释，②是稀释涂布平板法接种，③是平板划线法接种．

解答 解：（1）由于用化合物X、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出能高效降解化合物X的细菌（目地菌），所以该培养基为选择培养基．由于微生物的生长需要水、无机盐、碳源、氮源和生长因子，所以化合X为目的菌提供碳源和氮源等营养要素．从土壤中富集能有效降解有机化合物X的细菌时，应选用液体培养基．
（2）进行梯度稀释时，配制成10^-1浓度稀释液时，用无菌移液管从富集液的上清液中吸取1mL，移入盛有9mL无菌水的试管中，并依次配制10 ^-2～10 ^-10的梯度稀释液．
（3）据图分析，②的菌落均匀是稀释涂布平板法接种，③的平板上有明显的划痕是平板划线法接种．对玻璃器皿和培养基灭菌需要使用高压蒸汽灭菌法灭菌．
（4）据表分析，3号菌落的透明圈直径/菌落直径最大，降解化合物X的能力最强，所以应该使用3号菌落进行扩大生产．
（5）实验中空白培养基培养的目的是作为对照实验，以检验培养基和平板的灭菌是否合格．
故答案为：
（1）碳源（或氮源、碳源）   液体
（2）9
（3）稀释涂布平板法、平板划线法    高压蒸汽灭菌法
（4）3   透明圈直径/菌落直径越大，降解化合物X的能力越强
（5）检验培养基和平板的灭菌是否合格

点评 本题的知识点是选择培养基的选择作用，目的菌的筛选、微生物的培养等知识，主要考查学生运用微生物培养的知识解决生活中问题的能力．