题目内容
【生物-选修模块1：生物技术实践】
利用微生物分解秸秆具有非常广泛的应用前景．如生物乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注，生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源．我国利用农作物废弃物（秸秆）生产乙醇，其技术流程为：纤维素酶解→酵母发酵→蒸馏→成品．
（1）纤维素酶的成本能否下降，是能否实现乙醇工业化生产的关键因素．纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取．某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养．
①培养纤维素酶分解菌的土样最好选择 环境采集．
②以下是一种培养基配方：纤维素5g、NaNO31g、Na2HPO4?7H20 1.2g、KH2PO40.9g、MgSO4?7H2O 0.5g、KCl 0.5g、酵母膏0.5g、水解酪素0.5g（蒸馏水定容到1000mL）．该培养基能够增加样品中纤维素分解菌的浓度，其原理是 ．
③为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入 染液，将筛选获得的菌液稀释后用 方法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生 的菌落作为菌种进行扩大培养．
（2）进行工业化酶解时，为了使纤维素酶能反复使用，可以采用 技术．在葡萄酒制作过程中，为了提高葡萄酒的品质和降低生产成本，许多厂家使用固定化酵母细胞，制备固定化酵母细胞多采用 法．
（3）发酵时乙醇浓度升高会对酵母菌产生毒性，从而影响进一步的发酵．科学家利用基因工程方法创造出一种对乙醇浓度有高耐受力的酵母菌新菌种，该过程需采用PCR技术扩增目的基因．与体内DNA复制相比，PCR反应体系需加入哪两种特别的物质？ ．
利用微生物分解秸秆具有非常广泛的应用前景．如生物乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注，生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源．我国利用农作物废弃物（秸秆）生产乙醇，其技术流程为：纤维素酶解→酵母发酵→蒸馏→成品．
（1）纤维素酶的成本能否下降，是能否实现乙醇工业化生产的关键因素．纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取．某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养．
①培养纤维素酶分解菌的土样最好选择
②以下是一种培养基配方：纤维素5g、NaNO31g、Na2HPO4?7H20 1.2g、KH2PO40.9g、MgSO4?7H2O 0.5g、KCl 0.5g、酵母膏0.5g、水解酪素0.5g（蒸馏水定容到1000mL）．该培养基能够增加样品中纤维素分解菌的浓度，其原理是
③为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入
（2）进行工业化酶解时，为了使纤维素酶能反复使用，可以采用
（3）发酵时乙醇浓度升高会对酵母菌产生毒性，从而影响进一步的发酵．科学家利用基因工程方法创造出一种对乙醇浓度有高耐受力的酵母菌新菌种，该过程需采用PCR技术扩增目的基因．与体内DNA复制相比，PCR反应体系需加入哪两种特别的物质？
考点：土壤中能分解纤维素的微生物及其应用价值,酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋
专题：
分析：用植物秸秆生产酒精是利用微生物进行发酵的过程．植物秸秆中的有机物主要是纤维素，需要纤维素酶才能将其水解成葡萄糖，生长在腐木上的霉菌及反刍动物瘤胃中生存的某些微生物中含有纤维素酶，若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所用的培养基为选择培养基，利用的碳源为纤维素．发酵阶段需要的菌种是酵母菌，生产酒精时要控制的必要条件是无氧（密封、密闭）．
解答：
解：（1）①富含纤维素的地方纤维素分解菌含量较多．
②该培养基是以纤维素为唯一碳源的选择培养基，其原理是培养基中纤维素是主要碳源，有利于纤维素分解菌生长，同时抑制其他微生物生长．
③纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别，刚果红可以与纤维素结合形成红色复合物，经稀释涂布平板法接种后的培养皿上纤维素分解菌产生的纤维素酶可以将纤维素分解为葡萄糖而出现透明圈．
（2）进行工业化酶解时，为了使纤维素酶能反复使用，可以采用固定化酶技术．固定化酵母细胞常采用包埋法．
（3）PCR反应体系需加入两种引物、耐热的DNA聚合酶（Taq DNA聚合酶）．
故答案为：
（1）①富含纤维素
②培养基中纤维素是主要碳源，有利于纤维素分解菌生长，同时抑制其他微生物生长
③刚果红 涂布平板法 透明圈
（2）固定化酶 包埋
（3）两种引物、耐热的DNA聚合酶（Taq DNA聚合酶）
②该培养基是以纤维素为唯一碳源的选择培养基，其原理是培养基中纤维素是主要碳源，有利于纤维素分解菌生长，同时抑制其他微生物生长．
③纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别，刚果红可以与纤维素结合形成红色复合物，经稀释涂布平板法接种后的培养皿上纤维素分解菌产生的纤维素酶可以将纤维素分解为葡萄糖而出现透明圈．
（2）进行工业化酶解时，为了使纤维素酶能反复使用，可以采用固定化酶技术．固定化酵母细胞常采用包埋法．
（3）PCR反应体系需加入两种引物、耐热的DNA聚合酶（Taq DNA聚合酶）．
故答案为：
（1）①富含纤维素
②培养基中纤维素是主要碳源，有利于纤维素分解菌生长，同时抑制其他微生物生长
③刚果红 涂布平板法 透明圈
（2）固定化酶 包埋
（3）两种引物、耐热的DNA聚合酶（Taq DNA聚合酶）
点评：本题主要考查纤维素分解菌的筛选过程，意在强化学生对微生物筛选与分离的理解运用．
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