Question

安徽怀远盛产石榴，石榴酒是当地的特产酒，宁夏永宁盛产葡萄，葡萄酒是当地的特产酒，湖南洞庭乃鱼米之乡，家庭擅长米酒酿制．

（1）以上三地家庭酿制当地特产酒时，不必向料中接种酵母菌的是

 

地区．为什么？

 

．某家庭用50斤容量的瓷坛初次酿制30斤葡萄酒，几天后瓷坛塑料封口外鼓，酒香四溢，非常成功．来年信心大增，照去年原样酿制50斤，结果二十几天过去了，仍无什么酒味，塑料封口也不外鼓，原因应是

 

．
（2）由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，科研人员将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种，过程如图甲所示．
A．图甲中，为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以

 

作为唯一的碳源．②③过程需要重复多次，目的是经筛选纯化获得

 

．
B．某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示．该同学的接种方法是

 

；推测该同学接种时可能的操作失误是

 

．
C．若要对培养液中的酵母菌进行计数，下表是取0.1ml菌液进行涂布时，不同稀释倍数下统计的平板培养基上的菌落数：

稀释倍数		103	104	105
重复 实验	1	1498	125	12
	2	1208	135	9
	3	1189	130	6

根据表中数据估算培养液中的酵母菌的浓度约为

 

个/mL．

Answer 1

考点：酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋,微生物的分离和培养

专题：

分析：分析图甲：图甲是将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种的过程．图中①表示基因表达载体的构建过程；②、③过程重复几次的目的是纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌．
分析图乙：图乙是一个平板经培养后的菌落分布，可见其采用的是稀释涂布平板法，但图中群落分布相对较集中．

解答： 解：（1）以上三地家庭酿制当地特产酒时，不必向料中接种酵母菌的是宁夏永宁地区，原因是葡萄皮表面有野生酵母菌．初次酿制时瓷坛塑料封口外鼓，而再次酿制时塑料封口不外鼓，说明菌种初期发酵氧气不足，酵母菌不能大量繁殖，因此不能发酵产生大量酒精．
（2）A、普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，而工程酵母菌可以高效利用淀粉，所以用以淀粉为唯一碳源的选择培养基可以选出工程酵母菌．②、③过程重复几次的目的是纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌．
B、由图乙可知，该同学采用的是稀释涂布平板法，但菌落比较集中，没有很好的分散开来，可能是涂布不均匀导致的．
C、根据表中数据可知，稀释倍数为10³和10⁵时，各组数据之间的误差较大，而稀释倍数为10⁴时，各组数据比较接近，因此可以根据稀释倍数为10⁴时的数据估算培养液中酵母菌的浓度，即

126+128+133

3

×104×10=1.29×10⁷个/ml．
故答案为：
（1）宁夏永宁   葡萄皮表面有野生酵母菌    菌种初期发酵氧气不足，酵母菌不能大量繁殖
（2）A、淀粉     分解淀粉能力强的酵母菌   
B、稀释涂布平板法     涂布不均匀     
C、1.30×10⁷

点评：本题以工程菌为素材，结合图表综合考查基因工程、微生物的实验室培养、果酒制作、培养液中酵母菌数量的变化，要求考生识记基因工程的工具及操作步骤；识记微生物的接种方法，能根据图乙判断接种方法及图乙现象出现的原因；能分析表格，明确稀释倍数为10³和10⁵时，各组数据之间的误差较大，可通过稀释倍数为10⁴时的数据估算培养液中酵母菌的浓度．