Question

18．姜黄素是降脂中药姜黄的提取物．科学家通过分析姜黄素对培养的小鼠巨噬细胞LDL（一种脂蛋白）受体的影响来探究它的降脂机理，请补充以下实验步骤，并完成表格设计．
实验材料：小鼠的巨噬细胞、培养液以及已配制好的含有浓度
为0.3μg/mL、0.6μg/mL、0.9μg/mL姜黄素的培养液、CO₂培养箱、测定光密度值的仪器．（说明：光密度值与受体数量呈正相关）
请回答：
（1）实验步骤：
①取小鼠的巨噬细胞用培养液制成细胞悬液，等分为4个组，分别编号为A、B、C、D，放入CO₂培养箱中（在适宜的温度和pH条件下）进行增殖培养．．
②实验组分别用适量且等量的姜黄素浓度为0.3μg/mL、0.6μg/mL、0.9μg/mL的培养液培养巨噬细胞，对照组则用等量的不含姜黄素的培养液培养巨噬细胞，每组5个样本，每个样本中含巨噬细胞5.0×10⁵个．
③培养两天后，将样本经一系列处理，再分别用仪器测定每组样本光密度值并求出平均值．
（2）请设计一张呈现实验结果的表格：研究不同姜黄素浓度下对受体数量影响的结果表

实验处理	对照组	实验组
		姜黄素浓度
		0.3μg/mL	0.6μg/mL	0.9μg/mL
光密度值

．
（3）实验结论：姜黄素能够使巨噬细胞膜上的LDL受体数量增加，且姜黄素浓度与LDL受体数量呈正相关．

Answer 1

分析 1、动物细胞培养条件：
（1）无菌无毒环境：无菌--对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素．；无毒--定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害．
（2）营养：
成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分．
培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基）
（3）温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4．
（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO₂的混合气体的培养箱中进行培养．O₂：是细胞代谢所必需的  CO₂主要作用是维持培养液的pH．
2、实验目的是研究姜黄素对培养的小鼠巨噬细胞LDL受体的影响，因此设置的对照组中应用等量的不含姜黄素的培养液培养细胞．

解答 解：动物细胞培养要合适的温度、PH等、定期更换培养液以清除细胞代谢过程中积累的有害物质，实验目的是研究姜黄素对培养的小鼠巨噬细胞LDL受体的影响，因此设置的对照组中应用等量的不含姜黄素的培养液培养细胞．
（1）实验步骤如下：
①取小鼠的巨噬细胞用培养液制成细胞悬液，放入CO₂培养箱中，在适宜的温度和pH条件下进行增殖培养，为避免代谢产物积累对细胞造成危害，应定期更换培养液．    
②分别用适量且等量的姜黄素浓度为0.3μg/mL、0.6μg/mL、0.9μg/mL的培养液培养巨噬细胞，对照组则用等量的不含姜黄素的培养液培养巨噬细胞，每组5个样本，每个样本中含巨噬细胞5.0×10⁵个．
③培养2天后，将样本经一系列处理，再分别用仪器测定每组的光密度值．
（2）表格设计如下：

实验处理	对照组	实验组
		姜黄素浓度
		0.3μg/mL	0.6μg/mL	0.9μg/mL
光密度值

故答案为：
（1）①等分为4个组，分别编号为A、B、C、D，放入CO₂培养箱中（在适宜的温度和pH条件下）进行增殖培养．    
②实验组分别用适量且等量的姜黄素浓度为0.3μg/mL、0.6μg/mL、0.9μg/mL的培养液培养巨噬细胞，对照组则用等量的不含姜黄素的培养液培养巨噬细胞    
③分别用仪器测定每组样本光密度值并求出平均值    
（2）研究不同姜黄素浓度下对受体数量影响的结果表

实验处理	对照组	实验组
		姜黄素浓度
		0.3μg/mL	0.6μg/mL	0.9μg/mL
光密度值

点评 本题考查动物细胞培养相关的实验，意在考查能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力；具备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析、处理，能对一些简单的实验方案做出恰当的评价和修订的能力．