Question

4．科学家从病死的家禽和候鸟体内分离到了H5N1禽流感病毒，用以生产可以预防和治疗禽流感的抗体，图为单克隆抗体制备过程示意图，图中A～G分别表示生物技术或细胞名称，请回答有关问题：

（1）若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自感染H5N1病毒的动物或人的细胞，C过程化学诱导试剂常用PEG（聚乙二醇）．
（2）仅考虑某细胞两两融合，可能形成3种类型D细胞，需经两次筛选出既能迅速大量繁殖又能产生特异性抗体（填特点）的E细胞用于培养．
（3）在动物细胞培养过程中培养液中必须通入O₂和CO₂，通入CO₂的目的是维持培养液的pH．随着细胞分裂次数的增多，就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制．
（4）如果将单克隆抗体基因导入奶牛受精卵，再通过胚胎体外培养和胚胎分割和胚胎移植，可获得多头遗传物质相同奶牛，从而从乳汁中提取更多的抗体．

Answer 1

分析 1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体．
2、两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群．

解答 解：（1）单克隆抗体制备时将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自感染H₅N₁禽流感病毒的动物或人的细胞．C过程为动物细胞融合，利用的诱导方法有物理法（电激、离心、振动等）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）．
（2）假设仅考虑某两个细胞的融合，则可能形成杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞、效应B细胞自身融合细胞3种类型的D细胞，因此需用选择性培养基筛选出既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞用于培养．
（3）在动物细胞培养过程中培养液中必须通入O₂和CO₂，通入CO₂的目的是维持培养液的pH．随着细胞分裂次数的增多，就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制，需要用胰蛋白酶等处理使细胞从瓶壁上分离下来．
（4）培育转基因动物，应该选用受精卵作为受体细胞；来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质．如果将单克隆抗体基因导入奶牛受精卵，再通过胚胎体外培养和胚胎分割移植，可获得多头遗传物质相同奶牛，从而从乳汁中提取更多的抗体．
故答案为：
（1）感染H5N1病毒的动物或人　   PEG（聚乙二醇）
（2）既能迅速大量繁殖又能产生特异性抗体
（3）维持培养液的pH　接触抑制
（4）受精卵    胚胎分割和胚胎移植

点评 本题以单克隆抗体的制备图解为载体，考查了多项生物工程技术，具有一定的综合性．考生要识记动物细胞融合的方法；识记单克隆抗体制备的步骤；识记动物细胞培养的条件和特点．