题目内容
下列有关基因工程的应用中，对人类不利的是
A．制造“工程菌”用于药品生产
B．制造“超级菌”分解石油、农药
C．重组DNA诱发受体细胞基因突变
D．导入外源基因替换缺陷基因
下列是基因工程的有关问题，请回答：（1）限制性核酸内切酶可以识别双链DNA分子中的特定核苷酸序列，并可以使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的 （填化学键名称）断裂，形成的末端总体可分为两种类型，分别是 。（2）目的基因和运载体重组时需要的工具酶是 ，和限制性核酸内切酶相比，它对所重组的DNA两端碱基序列 （有或无）专一性要求。（3）图l表示构建表达载体时的某种质粒与目的基因。已知限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶II的识别序列和切点是—↓GATC—。 分析可知，最好选择限制酶 切割质粒，限制酶 切割目的基因所在的DNA，这样做的好处分别是 、_ 。（4）人的肤色正常与白化病受常染色体上基因A和a控制。若白化病型因与相对应的正常基因相比，白化病基因缺失了一个限制酶的切点，甲、乙、丙3人白化基因或相对应正常基因酶切后的电泳结果如图2。由图2可以判断出，乙和丙的基因型分别是 、 。如果甲与丙婚配，后代患病的概率为_ ___。
下列有关基因工程和细胞工程的叙述，正确的是（???? ）
A．DNA连接酶和质粒都是构建重组质粒必需的工具酶
B．运用克隆培养法多次传代培养细胞的过程中可能有少数细胞的基因型发生改变
C. 从愈伤组织获取的单细胞细胞质丰富、液泡大而细胞核小，具胚性细胞的特征
D．培育乳腺分泌的乳汁含所需产品的转基因羊时，通常应将目的基因导入乳腺细胞中
下列有关基因工程叙述正确的是
A．基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产品质优良和具有抗性的农作物
B．检测转基因生物是否转录出mRNA，应通过DNA-DNA杂交方法
C．基因表达载体的构建是基因工程的核心
D．将目的基因导入受体细胞的过程中进行了碱基互补配对
分析有关基因工程的资料，回答问题。（8分）
下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
58、一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割后，含有 个游离的磷酸基团。
59、用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是
。
60、为了获取重组质粒，应将 与 混合，并加入 酶。
61、重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。
62、若外源DNA中共有a个碱基对，其中鸟嘌呤有b个，则其连续复制4次，至少需要提供胸腺嘧啶 个。
63、利用转基因牛、羊乳汁提取药物工艺简单，甚至可能直接饮用治病。如果将药物蛋白基因移到动物如牛、羊的膀胱上皮细胞中，利用转基因牛羊尿液生产提取药物比乳汁提取药物的更大优越性在于 。
回答下列有关生物工程的问题（11分）
Ⅰ．红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EP0来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO），其生产流程如右图。
（1）图中①所指的是 技术。
（2）图中②所指的物质是 ，③所指的物质是 。
（3）培养重组CHO 细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞产物积累对细胞自身造成危害，应定期更换 。
（4）检测 rhEPO外活性需用抗rhEPO单克隆抗体。分泌单克隆抗体的
细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成
Ⅱ．植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。运用微型繁殖技术可以培育出大量的芦荟幼苗，其培养的基本过程如下：
（5）选取合适外植体的基本原则是
。繁殖培育芦荟时，一般选取 作为外植体。
（6）在外植体接种2－5天后，若发现外植体有污染的情况，原因可能
是 。
（7）在生长过程中，愈伤组织在诱导培养基中未形成根，但分化出了芽，其原
因可能是
Ⅱ．植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。运用微型繁殖技术可以培育出大量的芦荟幼苗，其培养的基本过程如下：