Question

16．“口嚼酒”因日本著名动画电影导演新海诚的新作《你的名字》而引起人们的关注．世界上有些地方很就有口嚼酒的记载．请回答下列相关问题：
（1）口嚼酒的做法是：首先需要将米煮熟，然后放入口中咀嚼-段时间，直至米粒变为糊状，再将其吐入特制容器中，令其发酵，经过几天便成为甜酸味的酒．上述的制作过程中，“咀嚼”可能具有两个作用，一是增大米饭与酶的接触面积，有利于发酵，二是使唾液淀粉酶将米饭中的淀粉分解成麦芽糖．参与口嚼酒形成初期的微生物主要是来自空气中的酵母菌，末期形成酸味，可能是因为密封不严，产生了醋酸等物质．
（2）口嚼酒是一种自酿酒，不仅品质不高，而且卫生条件难以把握，会有杂菌滋生的危险．某生物兴趣小组想探究口嚼酒制作过程中会滋生哪些微生物，进行了进一步的实验，实验步骤如下：
①制作口嚼酒．
②制作培养基：计算→称量→溶化→灭菌（或高压蒸汽灭菌）→倒平板．
③接种：每天同一时间将口嚼酒液体摇匀后按照图1和图2的方法进行操作，该方法是稀释涂布平板法．并在每天接种的培养皿上注明培养日期，最后将所有培养基放在相同且适宜的环境下培养．
④经过一段适宜时间后，观察不同培养基上的菌落数和菌落的形态，并进行品种鉴定．图3是三个不同时间获得的培养基，其时间先后为B、C、A（填字母）．

上述实验在时间上形成前后对照，但是还需要设置一个空白对照，目的是检验培养基灭菌是否彻底．
（3）兴趣小组成员在实验后期看到培养基上长满了许多杂菌菌落，若他们采用图4的方法对杂菌中的母的菌进行纯化，则在5（填数字）区最可能获得纯净的目的菌．操作过程中每次划线前灼烧接种环的目的是杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种．

Answer 1

分析 1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量；             
（2）在无氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2CO₂+2C₂H₅OH+能量．
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸．
当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸．
3、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）口腔中唾液淀粉酶，因此“咀嚼”可能具有两个作用，使唾液淀粉酶将米饭中的淀粉分解成麦芽糖，同时通过咀嚼可以增大酶与米饭的接触面积，有利于发酵．酿酒是利用酵母菌无氧呼吸产生酒精，该酵母菌主要是来自空气，末期形成酸味，可能是因为密封不严，混入了醋酸菌，导致产生了醋酸等物质．
（2）实验目的为探究口嚼酒制作过程中会滋生哪些微生物：
①制作口嚼酒．
②制作培养基：计算→称量→溶化→灭菌（或高压蒸汽灭菌）→倒平板．
③接种：图1和图2采用的是稀释涂布平板法．
④培养时间越长，菌落数越多，图3是三个不同时间获得的培养基的时间先后为B、C、A．
上述实验在时间上形成前后对照，但是还需要设置一个空白对照，目的是检验培养基灭菌是否彻底．
（3）平板划线法中划线次数越多，菌落数越少，因此对杂菌中的母的菌进行纯化，在5区最可能获得纯净的母的菌．
故答案为：
（1）麦芽糖    酵母菌     醋酸
（2）②灭菌（或高压蒸汽灭菌）     ③稀释涂布平板法     ④B、C、A     检验培养基灭菌是否彻底
（3）5     杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种

点评 本题以“口嚼酒”为题材，考查了微生物的分离与培养以及果酒、果醋的制作的有关知识，要求考生识记参与果酒和果醋制作的微生物及其代谢类型，掌握微生物分离与纯化的方法以及灭菌的措施，能结合所需的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．