Question

【题目】为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应 用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。

（1）获得耐盐基因后，构建基因表达载体所用的酶有：_____

（2）将基因表达载体导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和_____法。

（3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用__________技术。

（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，首先可采用_____技术，即用放射性同位素标记的目的基因作探针进行分子杂交检测。

Answer 1

【答案】 限制性核酸内切酶（限制酶）和 DNA 连接酶 基因枪(花粉管通道) 植物组织培养 DNA 分子杂交

【解析】试题分析：基因工程操作步骤包括目的基因的获取、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。将植物细胞培育成植株需利用植物组织培养技术，原理是植物细胞的全能性。

（1）构建基因表达载体用到的酶有限制酶和DNA连接酶。先用限制酶切割含目的基因的DNA片段和载体，然后用DNA连接酶连接两片段形成基因表达载体。（2）将基因表达载体导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和基因枪法（或花粉管通道法）。（3）由水稻细胞培育成植株需利用植物组织培养技术。（4）判断耐盐转基因水稻是否培育成功，首先利用DNA分子杂交技术检测耐盐是否整合到水稻细胞的染色体DNA上，再利用分子杂交技术检测耐盐基因是否转录形成mRNA，最后利用抗原抗体杂交技术检测耐盐基因是否翻译出相应的蛋白质。