Question

12．表所示为筛选某种纤维素分解菌的培养基配方，用刚果红染色法鉴定．请据此回答下列问题：

NaNO3	Na2HPO47H2O	KH2PO4	MgSO47H2O	KCl	酵母膏	水解酪素	纤维素粉	蒸馏水
1g	1.2g	0.8g	0.5g	0.5g	0.5g	0.5g	5g	定容至1000mL

（1）根据上述配方可知该培养基是液体 培养基（填“固体”或“液体”）．为观察菌落特征，通常在该培养基中加入琼脂．从功能上看，该培养基为选择培养基，因为它只允许分解纤维素的细菌生长，其他种类的细菌会因为缺乏碳源 生长受抑制．
（2）该培养基的配制步骤包括：计算，称量，溶化，灭菌，倒平板；该培养基通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，据图结果分析在培养基接种时采用了稀释涂布平板 法．
（3）若某同学取稀释倍数为106的稀释液各0.1mL分别制作了三个平板，统计的菌落数分别为183、176和169，则1mL 样品中的细菌数是1.76×10⁹ 个，该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少．

Answer 1

分析 （1）培养基为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质．营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和水．根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等根据用途分选择培养基、鉴别培养基．根据性质分为液体、半固体和固体培养基．
（2）在纤维素分解菌的分离实验中，刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，这样可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌．

解答 解：（1）分析上述培养基配方可知，培养基中含有碳源、氮源、无机盐、水等，但是没有加凝固剂，遗传你该培养基是液体培养基．为观察菌落特征，通常在该培养基中加入琼脂制备固体培养基．从功能上看，该培养基为选择培养基，因为它只允许分解纤维素的细菌生长，其他种类的细菌会因为缺乏碳源 生长受抑制．
（2）该培养基的配制步骤包括：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板；该培养基通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌．图中培养基中菌落均匀分布，因此在培养基接种时采用了稀释涂布平板 法．
（3）若某同学取稀释倍数为10⁶的稀释液各0.1mL分别制作了三个平板，统计的菌落数分别为183、176和169，则1mL样品中的细菌数=（183+176+169）÷3×10⁶÷0.1=1.76×10⁹个．稀释涂布平板法中，如果两个活菌聚在一起只能形成一个菌落，因此该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少．
故答案为：
（1）液体    琼脂   缺乏碳源
（2）倒平板   高压蒸汽灭菌   稀释涂布平板
（3）1.76×10⁹  少

点评 本题主要考查纤维素分解菌的相关知识，意在强化学生对纤维素分解菌的相关知识点的识记与理解．