Question

9．根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（1）限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有黏性末端和平末端．
（2）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，一类是从大肠杆菌分离得到的，称为E•coliDNA连接酶，另一类是从T₄噬菌体分离得到的，称为T4DNA连接酶，这两类酶的作用是恢复限制酶切开的磷酸二酯键．
（3）目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化．若受体细胞是大肠杆菌，通常用Ca²⁺处理细胞，使细胞处于感受态，易于吸收周围环境中的DNA分子．
（4）目的基因导入动物细胞采用最多的方法是显微注射法．动物基因工程可以提高动物的生长速率是由于外源生长激素基因在受体动物体内的表达：若用转基因动物生产药物，科学家通常将药物蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，最终培育的转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁生产所需要的药物，因而称为乳腺生物反应器．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）限制性内切酶切割DNA分子后产生两种类型的末端，即黏性末端和平末端．
（2）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，一类是从大肠杆菌分离得到的，称为E•coliDNA连接酶，另一类是从T₄噬菌体分离得到的，称为T4DNA连接酶，这两类酶的作用是恢复限制酶切开的磷酸二酯键．
（3）目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化．将目的基因导入微生物细胞常用感受态细胞法，即用Ca²⁺处理微生物细胞，使细胞处于易于吸收周围环境中DNA分子的感受态．
（4）将目的基因导入动物细胞采用最多的方法是显微注射法．动物基因工程可以提高动物的生长速率是由于外源生长激素基因在受体动物体内的表达．若用转基因动物生产药物，科学家通常将药物蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，最终培育的转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁生产所需要的药物，因而称为乳腺生物反应器．
故答案为：
（1）黏性末端    平末端 
（2）大肠杆菌   T₄噬菌体    磷酸二酯键
（3）转化   Ca²⁺
（4）显微注射法    生长激素   乳腺生物反应器

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．