Question

4．如图示动物细胞培养过程中，动物细胞增殖情况的变化曲线（图中B、D两点表示经筛选后继续培养），请据图回答：
（1）AB段可能发生了接触抑制现象．
（2）运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞．进行细胞培养时，必须首先用胰蛋白酶（或“胶原蛋白酶”）处理内细胞团，使之分散成单个细胞．体外培养胚胎干细胞能否获得动物器官？不能（填“能”或“不能”）．
（3）动物细胞培养培养液的成分中除了葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等物质外，通常还要加入血清、血浆等一些天然成分．还需给予一定量的气体，其中O₂的作用是是细胞新陈代谢所必需的．动物细胞培养过程中常在培养液里添加抗生素来防治污染；若保存细胞，通常在冷冻条件下，因为在这种条件下，细胞中酶的活性降低，细胞代谢速率降低．
（4）为制备单克隆抗体，需将特定抗原注射到小鼠体内，以此获取B淋巴细胞，同时可选取图中D点的细胞与该细胞经诱导剂-诱导融合形成杂交细胞．为筛选能够产生单克隆抗体的杂交细胞，至少需要经过2次筛选才能达到目的．最终获得的杂交细胞的特点是既能无限增值，又能产生大量的专一性的抗体．

Answer 1

分析 本题考查动物细胞培养的相关知识．
1、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养．
2、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁．细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制．

解答 解：（1）当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，即会发生接触抑制现象，AB段细胞停止增殖，可能发生了接触抑制现象．
（2）进行细胞培养时，必须首先用胰蛋白酶（或“胶原蛋白酶”）处理内细胞团，使之分散成单个细胞．在体外培养胚胎干细胞不能获得动物器官，因为胚胎干细胞在体外培养条件下可以增殖但不发生分化．
（3）动物细胞培养培养液的成分中除了葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等物质外，通常还要加入血清、血浆等一些天然成分．还需给予一定量的气体，其中O₂的作用是细胞新陈代谢所必需的．动物细胞培养过程中常在培养液里添加抗生素来防治污染；若保存细胞，通常在冷冻条件下，细胞中酶的活性降低，细胞代谢速率降低．
（4）为制备单克隆抗体，需将特定抗原注射到小鼠体内，以此获取B淋巴细胞，同时可选取图中D点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞，因该点细胞已癌变．为筛选能够产生单克隆抗体的杂交细胞，至少需要经过2次筛选，第一次为了筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选出能产生抗体的杂交瘤细胞．最终获得的杂交细胞的特点是既能无限增值，又能产生大量的专一性的抗体．
故答案为：
（1）接触抑制
（2）胰蛋白酶（或“胶原蛋白酶”）   不能
（3）血清、血浆   是细胞新陈代谢所必需的  抗生素   冷冻  酶
（4）B淋巴（或“B”或“浆”）   D  2   既能无限增值，又能产生大量的专一性的抗体

点评 本题考查动物细胞的培养与单克隆抗体的制备，意在考察考生对生物学知识的理解能力和综合分析能力，难度适中．