Question

7．下列有关生物技术实践的叙述，不正确的是（　　）

• A． 在土壤中分解尿素的细菌的分离和计数实验中，应采用平板划线法
• B． 在DNA粗提取与鉴定实验中，向溶解DNA的烧杯中加蒸馏水的目的是漂洗DNA
• C． 腐乳制作过程中，料酒的用量过多，后期成熟时间将延长
• D． 提取植物细胞DNA时需在研钵中加入洗涤剂和食盐

Answer 1

分析 1、DNA粗提取和鉴定的原理：
（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性．
（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色．
2、DNA粗提取和鉴定的过程：
（1）实验材料的选取：凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大．
（2）破碎细胞，获取含DNA的滤液：
动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可．如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜．例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液．
（3）去除滤液中的杂质：
方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA；方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同．
方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开；方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离．
（4）DNA的析出与鉴定：
①将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液，静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分．
②取两支20ml的试管，各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解．然后，向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂．混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝．
3、微生物的计数需要使用稀释涂布平板法．腐乳的制作过程中，含量一般控制在12%左右．加酒可以抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味．DNA和蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同．

解答 解：A、在土壤中分解尿素的细菌的分离和计数实验中，应采用稀释涂布平板法，A错误；
B、向溶解DNA中的烧杯中加蒸馏水的目的是稀释氯化钠溶液的浓度，使DNA析出，B错误；
C、腐乳制作过程中，料酒的用量过多，后期成熟时间延长，C正确；
D、提取植物细胞DNA时需在研钵中加入洗涤剂和氯化钠等试剂，其中洗涤剂可能瓦解细胞膜，氯化钠可溶解DNA，D正确．
故选：AB．

点评 本题主要考查微生物培养、DNA粗提取和鉴定的相关知识，意在强化学生对相关知识点的理解与运用．