题目内容
【题目】如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ表示三种限制酶。请据图回答：
（1）经逆转录获得的人乳铁蛋白基因，可通过_____技术进行扩增。该技术使用的DNA聚合酶最主要的特点是_____。
（2）将人乳铁蛋白基因插入载体时，需选用_____限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。基因表达载体除目的基因外，还必须有复制原点、_____、终止子和标记基因等。
（3）过程①常用的操作方法是_____法。导入目的基因后应在含_____的培养基上进行筛选含有重组载体的受精卵。
（4）进行过程②之前，需用相应的激素处理代孕牛，使其处于_____状态。
（5）对早期胚胎进行分割，可获得多个新个体，该种生殖方式属于_____。
【答案】PCR 耐高温 BamHⅠ、HindⅢ 启动子 显微注射 氨苄青霉素 同期发情 无性生殖
【解析】
分析题图：图示是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线，包括基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、早期胚胎培养、胚胎移植等步骤，其中过程①是将重组质粒导入受体细胞；过程②需采用胚胎移植技术。
（1）经逆转录获得的人乳铁蛋白基因，可通过PCR技术进行扩增。该技术使用的DNA聚合酶最主要的特点是耐高温。
（2）根据载体和人乳铁蛋白基因上限制酶种类和切点可知，将人乳铁蛋白基因插入载体时，需选用BamHⅠ、HindⅢ限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。基因表达载体除目的基因外，还必须有复制原点、启动子、终止子和标记基因等。
（3）过程①常用显微注射法将目的基因导入受精卵。导入目的基因后应在含氨苄青霉素的培养基上进行筛选含有重组载体的受精卵。
（4）进行过程②胚胎移植之前，需用相应的激素处理代孕牛，使其处于同期发情状态。
（5）对早期胚胎进行分割，可获得多个新个体，该种生殖方式属于无性生殖。
