Question

请回答与转基因牛培育过程相关的问题：
（1 ）基因工程的核心步骤是

 

．限制性核酸内切酶主要是从

 

生物中分离纯化出来的，大多数限制酶的识别序列有

 

个核苷酸组成
（2）将目的基因导入供体牛受精卵最为有效的方法是

 

．进行早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分以及

 

和

 

等物质．
（3）若利用该受精卵获得两头或多头犊牛需在

 

时期，进行

 

．
（4）经胚胎移植后待受体母牛产出犊牛，为确定其DNA是否插入了有关目的基因，可用

 

技术进行检测．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,胚胎移植

专题：

分析：1、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．其中基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤．
2、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，经移植获得同卵双胚或多胚的技术．进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育．

解答： 解：（1）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建．限制性核酸内切酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，大多数限制酶的识别序列有6个核苷酸组成，如EcoRⅠ的识别序列为．
（2）显微注射技术是将目的基因导入动物细胞最有效的方法．动物细胞培养时，培养液中除了含有一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分以及激素和动物血清等物质．
（3）采用胚胎分割技术可以产生同卵双胚或多胚．胚胎分割时应选择形态正常、发育良好的桑椹胚或囊胚．
（4）检测转基因生物染色体的DNA上是否插入目的基因常采用DNA分子杂交技术．
故答案为：
（1）基因表达载体的构建     原核       6
（2）显微注射技术      激素      动物血清
（3）桑椹胚或囊胚      胚胎分割
（4）DNA分子杂交

点评：本题考查基因工程、动物细胞培养、胚胎分割移植，要求考生识记基因工程的工具及操作步骤；识记动物细胞培养的过程及条件；识记胚胎分割的概念，掌握胚胎分割技术的特点及注意事项，能运用所学的知识解答．