Question

7．土壤农杆菌能将自身Ti质粒的T-DNA整合到植物染色体DNA上，诱发植物形成肿瘤．T-DNA中含有植物生长素合成酶基因（S）和细胞分裂素合成酶基因（R），如图1所示，它们的表达与否能影响相应植物激素的含量，进而调节肿瘤组织的生长与分化．基因工程常用Ti质粒作为运载体，图2表示抗虫棉培育中使用的三种限制酶A、B、C的识别序列以及Ti质粒上限制酶切割位点的分布，抗虫基因内部不含切割位点，两侧标明序列为切割区域．

（1）据图2分析，切取抗虫基因时，使用酶B和酶C限制酶，切割Ti质粒时，使用酶A和酶B限制酶．
（2）成功建构的重组质粒含有限制酶A的识别位点0个，若用酶C处理该重组质粒，将得到2个DNA片段．
（3）若抗虫基因插入的位置在R基因内部，筛选出生根瘤植株即是成功导入抗虫基因的棉花植株．

Answer 1

分析 分析题图：在目的基因的左侧只有B酶的识别位点，右侧只有C酶的识别位点；质粒上含有三种酶的识别位点，其中T-DNA上含有酶A和酶B的识别位点，因此应选用酶B和酶C切取目的基因，选用酶A和酶B切割Ti质粒．

解答 解：（1）在目的基因的左侧只有B酶的识别位点，右侧只有C酶的识别位点，因此应该使用酶B和酶C切取抗虫基因，应该将目的基因插入T-DNA，而T-DNA中含有A酶和B酶的切割位点，因此应该使用酶A和酶B切割Ti质粒．
（2）酶A和酶C切割形成的黏性末端相同，使用酶B和酶C切取抗虫基因，使用酶A和酶B切割Ti质粒，再用DNA连接酶连接两者形成重组质粒后，重组质粒不含酶A的识别位点，成功建构的重组质粒含有两个酶C的识别位点，因此用酶C处理重组质粒将得到2个DNA片段．
（3）若抗虫基因插入的位置在R基因内部，能诱发植物形成肿瘤，故筛选出生根瘤植株即是成功导入抗虫基因的棉花植株．
故答案为：
（1）酶B和酶C     酶A和酶B   
（2）0    2 
（3）生根瘤

点评 本题结合图解，考查基因工程的技术和原理，要求考生识记基因工程的概念、原理、操作工具及操作步骤，能根据图中限制酶的识别序列及切割位点选择合适的限制酶，再结合所学的知识准确判断解答．