Question

7．在农业用地中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度一定，该除草剂的培养基不透明）．

（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理．
（2）要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，上述培养皿中培养基的特点是：固体培养基且以除草剂作唯一氮源．若需要调节培养基pH，应该在各种成分都溶化后且分装前（填“前”或“后”）进行．
（3）在划线前，接种环应该在酒精灯火焰上灼烧灭菌．培养后发现，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是培养基中缺少这些细菌可利用的氮源或有氧条件抑制了这些细菌的生长．
（4）在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是氮气，有透明带菌落利用的氮源主要是该除草剂，据此可筛选出目的菌．
（5 ）A细菌和B细菌都能降解该除草剂，研究发现以每克菌体计算，A细菌降解该除草剂的能力比B细菌要强，对此现象合理的假设是A细菌酶活性更强（或A细菌酶量更多）．

Answer 1

分析 分析题图：该实验是从土壤中筛选分离能降解除草剂的微生物的过程．这样的实验要将土壤稀释处理，以除草剂为唯一的氮源进行处理筛选土壤微生物，以菌落计数法进行统计计数．

解答 解：（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，将浓度高的溶液通过稀释的方法降低浓度．
（2）利用该培养基的目的是筛选能降解除草剂的细菌，需要使用选择培养基，即培养基中应加入除草剂作为唯一的氮源；调节培养基的pH应在分装前进行．
（3）划线前，接种环应通过灼烧灭菌；由于该培养基中添加的氮源除草剂只能被能降解除草剂的细菌利用，因此，在该培养基上只有该细菌才能生长．
（4）根据题中信息“含除草剂的培养基不透明”，则可知无透明带菌落利用的氮源并不是除草剂，而是来自空气中的氮气，有透明带菌落利用的氮源为除草剂．
（5 ）降解除草剂的能力强弱与细菌所含有的相应酶的活性或数量有关．由于A细菌酶活性更强（或A细菌酶量更多），所以A细菌降解该除草剂的能力比B细菌要强．
故答案为：
（1）稀释
（2）以除草剂作唯一氮源 前
（3）灼烧灭菌  培养基中缺少这些细菌可利用的氮源
（4）氮气    该除草剂   
（5）A细菌酶活性更强（或A细菌酶量更多）

点评 本题考查了微生物分离与培养的实验，意在考查实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用及实验分析能力．