Question

4．Rag2基因（核基因重组激活基因）缺失的小鼠不能产生成熟的淋巴细胞，从而导致先天性免疫缺陷．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行如下图所示的基因治疗．其技术流程如图：

（1）动物细胞培养时培养箱中常加入95%和5%的CO₂，CO₂的主要作用是．培养过程中应定期更换培养液，以便去除代谢产物，防止其积累对细胞造成危害．
（2）进行核移植的供体细胞一般用培养10代以内的细胞，其原因是10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型．
（3）进行步骤①时，卵母细胞需发育到MⅡ中期；步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其内细胞团分离出ES细胞，在此之后的发育过程中，还可以从原始性腺中分离出ES细胞．
（4）选用Rag2基因缺失小鼠自身的体细胞经过如上图流程获得的造血干细胞对小鼠进行治疗，其好处是可以避免免疫排斥反应．

Answer 1

分析 分析题图：图示是利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag₂基因缺失小鼠进行基因治疗的过程图解，其中①表示核移植过程，②表示早期胚胎培养过程，③表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞．

解答 解：（1）动物细胞培养时培养箱中常加入95%和5%的CO₂，CO₂的主要作用是维持培养液的pH．培养过程中应定期更换培养液，以便去除代谢产物，防止其积累对细胞造成危害．
（2）进行核移植的供体细胞一般用培养10代以内的细胞，其原因是10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型．
（3）进行步骤①时，卵母细胞需发育到MⅡ中期；步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其内细胞团分离出ES细胞，在此之后的发育过程中，还可以从原始性腺中分离出ES细胞．
（3）选用Rag2基因缺失小鼠自身的体细胞经过如上图流程获得的造血干细胞对小鼠进行治疗，其好处是可以避免免疫排斥反应．
故答案为：
（1）维持培养液的pH        去除代谢产物
（2）能保持正常的二倍体核型
（3）MⅡ中          囊胚            内细胞团           原始性腺
（3）免疫排斥反应

点评 本题结合图解，综合考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题；识记核移植的具体过程；识记体外受精的具体过程及早期胚胎发育的过程，能结合所学的知识准确答题．