Question

如图为人工合成reAnti基因，转入猪成纤维细胞，做成转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答

（1）人工合成的reAnti基因可通过

 

技术手段体外迅速扩增．
（2）过程③要将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞的方法是

 

，重组质粒导入之后，可通过

 

技术，来检测reAnti基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上．
（3）从猪中取胎儿成纤维细胞，用

 

处理，然后进行分散培养．培养时，将培养瓶置于含

 

（要求写清楚每种气体所占比例）的混合气体培养箱中进行培养，培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，一般还应添加

 

．
（4）去核前的卵母细胞应培养到

 

期．其去核后与成纤维细胞通过电刺激后融合，形成重组细胞．再利用物理或化学方法刺激，使之完成细胞分裂和发育，在体外培养成重组早期胚胎．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,动物细胞与组织培养过程

专题：

分析：分析题图：①是获取目的基因的过程；②是基因表达载体的构建过程；③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞的过程；④采用显微技术去核；⑤是核移植过程；⑥动物细胞培养过程；⑦是胚胎移植过程；⑧是妊娠形成转基因克隆猪的过程．

解答： 解：（1）人工合成的reAnti基因可通过PCR技术手段扩增．
（2）过程③要将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞的方法是显微注射法，目的基因（reAnti基因）是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体上，可用DNA分子杂交技术进行检测．
（3）动物细胞培养时，需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织，使动物细胞分散成单个细胞．动物细胞培养时要放入到95%的空气（保证细胞代谢）和5%CO₂（调节培养液的PH）培养箱中．培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，一般还应添加动物血清．
（4）去核前的卵母细胞应培养到减数第二次分裂中期才成熟，其去核后与成纤维细胞通过电刺激后融合，形成重组细胞，再利用物理或化学方法刺激，使之完成细胞分裂和发育，在体外培养成重组早期胚．
故答案为：
（1）PCR    
（2）显微注射法   DNA分子杂交
（3）胰蛋白酶     95%的空气和5%CO2    动物血清
（4）减数第二次分裂中期

点评：本题结合我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，考查基因工程的原理和技术、动物细胞核移植技术、动物细胞培养，要求考生识记基因工程的原理及操作过程，能准确判断图中各过程的名称；识记动物细胞核移植的概念及过程；识记动物细胞培养的过程及条件．