Question

16．毒死蜱（C₉H₁₁C₁₃NO₃PS）是一种有机磷杀虫剂，长期使用将导致土壤中农药残留严重．某研究小组从长期施药的韭菜温室土壤（偏酸性）里分离出能降解毒死蜱的木霉，并对其降解特性进行初步研究．请回答：
（1）用于分离木霉菌种的培养基属于选择培养基．配制此培养基时，应加入毒死蜱作为唯一碳源．接种前，将培养基在适宜温度下放置适当的时间，观察培养基是否产生菌落，以确定培养基是否被污染．
（2）纯化木霉时，统计出0.2mL的稀释液在稀释倍数为10⁵的平板上的平均菌落数为40个，则每mL样液中的菌落数为2×10⁷个．用此法测定木霉数量，实际活菌数量要比统计的菌落数量多，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落．
（3）探究pH对木霉降解毒死蜱活性的影响
①研究小组向不同pH的培养基中分别加入100mg/L 毒死蜱，5天后检测毒死蜱的残留量（图1）．由图可推知：在偏酸性的土壤中，毒死蜱稳定性较好．

②研究小组向不同pH的培养基中分别加入100mg/L 毒死蜱，再分别接种1mL木霉悬液，混合均匀，5天后检测毒死蜱的残留量（图2）．在此韭菜温室土壤中，若要提高木霉对毒死蜱的降解活性，可对土壤作何处理？适当提高土壤的pH至7左右．

Answer 1

分析 1、培养基按功能分：

种类	制备方法	特征	用途
选择培养基	培养基中加入某种化学成分	根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率	加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
鉴别培养基	加入某种试剂或化学药品	依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计	鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌

2、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
其中，稀释涂布平板法可用于计数活菌．

解答 解：（1）要分离出能降解毒死蜱的木霉，需要以毒死蜱作为唯一碳源培养基，在该培养基上只有能降解毒死蜱的木霉能生存，其它微生物都不能生存，因此该培养基属于选择培养基．接种前，将培养基在适宜温度下放置适当的时间，观察培养基是否产生菌落，以确定培养基是否被污染．
（2）纯化木霉时，统计出0.2mL的稀释液在稀释倍数为10⁵的平板上的平均菌落数为40个，则每mL样液中的菌落数为40×$\frac{1}{0.2}{×10}^{5}$=2×10⁷个．用此法测定木霉数量，由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此实际活菌数量要比统计的菌落数量多．
（3）①由图1可推知：在偏酸性的土壤中，毒死蜱稳定性较好．
②由图2可知，在此韭菜温室土壤中，若要提高木霉对毒死蜱的降解活性，可适当提高土壤的pH至7左右．
故答案为：
（1）选择   毒死蜱   是否产生菌落
（2）2×10⁷     多      当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
（3）①毒死蜱稳定性较好         ②适当提高土壤的pH至7左右

点评 本题结合图解，考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的基本成分、种类及功能；识记接种微生物常用的两种方法，掌握微生物计数的方法；能分析题图并从中得出正确的结论．